[发明专利]靶向ErbB受体家族且自表达PD-1抗体的CAR-T细胞及其用途

权利要求书

1.一种T细胞，其特征在于，所述T细胞：

(1)含有表达靶向ErbB受体家族的嵌合抗原受体的编码序列和PD1抗体的编码序列；和/或

(2)表达靶向ErbB受体家族的嵌合抗原受体和PD1抗体。

2.如权利要求1所述的T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体包含任选的信号肽、通过刚性接头连接的T1E肽段和Herin肽段、铰链区、跨膜区、胞内共刺激信号域和胞内信号域。

3.如权利要求2所述的T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体具有以下一项或多项特征：

所述信号肽为CD4信号肽、CD8信号肽或CD28信号肽，优选为CD8信号肽；更优选地，所述CD8信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:5第1-22位氨基酸残基所示；

所述T1E的氨基酸序列如SEQ ID NO:5第23-77位氨基酸残基所示；

所述Herin的氨基酸序列如SEQ ID NO:5第93-171位氨基酸残基所述；

所述EAAAK接头的氨基酸序列如SEQ ID NO:5第78-92位氨基酸残基所述；

所述铰链区CD8的胞外铰链区、IgG1 Fc CH2CH3铰链区、IgD铰链区、CD28的胞外铰链区、IgG4 Fc CH2CH3铰链区和CD4的胞外铰链区，优选为为CD8铰链区或IgG4 CH2CH3铰链区；优选地，所述铰链区为IgG4 CH2CH3铰链区，其氨基酸序列如SEQ ID NO:5第172-399位氨基酸残基所示；

所述跨膜区为CD28跨膜区、CD8跨膜区、CD3ζ跨膜区、CD134跨膜区、CD137跨膜区、ICOS跨膜区和DAP10跨膜区中的一种；优选为CD28跨膜区，优选其氨基酸序列如SEQ ID NO:5第400-427位氨基酸残基所示；

所述胞内共刺激信号域包括共刺激信号分子的胞内结构域，包括CD28、CD134/OX40、CD137/4-1BB、淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶、诱导性T细胞共刺激因子(ICOS)和DNAX激活蛋白10的胞内结构域；优选地，所述共刺激信号分子胞内结构域是CD28胞内结构域，其氨基酸序列如SEQ ID NO:5第428-468位氨基酸残基所示；和

所述胞内信号域为CD3ζ胞内信号域或FcεRIγ胞内信号域；优选为CD3ζ胞内信号域，优选地所述CD3ζ胞内信号域的氨基酸序列如SEQ ID NO:5第469-580位氨基酸残基所示。

4.如权利要求2或3所述的T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体具有以下一项或多项特征：

所述信号肽的编码序列如SEQ ID NO:6第1-66位碱基序列所示；

所述T1E的编码序列如SEQ ID NO:6第67-231位碱基序列所示；

所述Herin的编码序列如SEQ ID NO:6第277-513位碱基序列所示；

所述EAAAK接头的编码序列如SEQ ID NO:6第232-276位碱基序列所示；

所述铰链区的编码序列如SEQ ID NO:6第514-1197位碱基序列所示；

所述跨膜区的编码序列如SEQ ID NO:6第1198-1281位碱基序列所示；

所述胞内共刺激信号域的编码序列如SEQ ID NO:6第1282-1404位碱基序列所示；和

所述胞内信号域的编码序列如SEQ ID NO:6第1405-1740位碱基序列所示。

5.如权利要求1-4中任一项所述的T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体含有CD8信号肽、以EAAAK接头连接的T1E和Herin、IgG4 CH2CH3铰链区、CD28跨膜区、CD28胞内结构域和CD3ζ胞内信号域；

优选地，所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO:5第23-580位氨基酸残基所示，或如SEQ ID NO:5所示；优选地，所述嵌合抗原受体的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示第67-1740碱基序列所示，或如SEQ ID NO:6所示。