[发明专利]科氏葡萄球菌S154及其在生物合成纳米硒中的应用有效
| 申请号: | 201711460184.X | 申请日: | 2017-12-28 |
| 公开(公告)号: | CN108048361B | 公开(公告)日: | 2021-01-15 |
| 发明(设计)人: | 郭岩彬;李奎;张暖暖;赵桂慎;吴文良;李花粉 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P3/00;C12R1/44 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;黄爽 |
| 地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 葡萄球菌 s154 及其 生物 合成 纳米 中的 应用 | ||
1.科氏葡萄球菌(Staphylococcus cohnii)S154,其特征在于,保藏编号为CGMCCNo.13328。
2.含有权利要求1所述科氏葡萄球菌S154的菌剂。
3.权利要求1所述科氏葡萄球菌S154在生物合成纳米硒中的应用,其特征在于,向发酵培养基中添加六价和/或四价无机硒盐,发酵培养科氏葡萄球菌S154,并从发酵产物中分离纯化纳米硒。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述发酵培养基中六价无机硒盐的浓度为0.001-500mM。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述发酵培养基中六价无机硒盐的浓度为10-400mM。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述发酵培养基中四价无机硒盐的浓度为0.001-400mM。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述发酵培养基中四价无机硒盐的浓度为0.1-300mM。
8.利用权利要求1所述科氏葡萄球菌S154生物合成纳米硒的方法,其特征在于,将S154菌株活化培养,以LB培养基为发酵培养基,亚硒酸钠浓度为20mM,将OD600=0.8-1.2的菌液按照1-5v/v%接菌量接种到发酵罐中,使发酵温度为35-39℃,搅拌速度为150-280rpm,发酵液体积:每分钟通气体积为1:0.5-3,罐压为1.0-1.4F/cm2,发酵60-150小时。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,还包括从发酵产物中分离纯化纳米硒的步骤;具体如下:
发酵液下罐,3000-10000rpm离心10-20min收集菌体沉淀,将沉淀用无菌生理盐水洗2-3遍,并用发酵液1/30体积的水重悬沉淀,所得菌悬液经冷冻干燥,即得纳米硒干粉。
10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,还包括从发酵产物中分离纯化纳米硒的步骤;具体如下:
a、发酵液下罐,3000-10000rpm离心10-20min收集菌体沉淀,将沉淀用无菌生理盐水洗2-3遍,并用发酵液1/30体积的水重悬沉淀,得到纳米硒悬液;
b、将纳米硒悬液转移至萃取塔中,按照纳米硒悬液0.5-0.8倍体积的量加入正己烷萃取3-5次,收集下层水相,3000-5000rpm离心20-40min,所得沉淀用无菌生理盐水洗2-3遍;冷冻干燥,即得纯纳米硒干粉。
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