[发明专利]用于生活污水处理的含有脂肪酶基因的重组工程菌及其构建方法有效
| 申请号： | 201711458989.0 | 申请日： | 2017-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN108251345B | 公开（公告）日： | 2021-07-20 |
| 发明（设计）人： | 谢悦波;姚竣耀;刘才群 | 申请（专利权）人： | 江苏世邦生物工程科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/62;C07K19/00;C02F3/34;C12N11/02;C02F101/16 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳 |
| 地址： | 211800 江苏省南京市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 生活 污水处理 含有 脂肪酶 基因 重组 工程 及其 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种生活污水处理方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）重组工程菌株BL21- pCAMBIA1301-sole-LIPY7进行诱导表达获得菌液；
2）脂肪酶LIPY7的纯化和固定化；
3）将固定化脂肪酶LIPY7进行生活污水处理；
所述重组工程菌BL21- pCAMBIA1301-sole-LIPY7的构建方法包括：将融合基因sole-LIPY7导入表达载体pCAMBIA1301中获得重组表达载体pCAMBIA1301-sole-LIPY7；将重组表达载体pCAMBIA1301-sole-LIPY7转化到大肠杆菌BL21中，挑取阳性克隆LB培养基中过夜培养得到重组工程菌株BL21- pCAMBIA1301-sole-LIPY7，所述融合基因sole-LIPY7的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；
所述脂肪酶LIPY7的纯化和固定化步骤为：将步骤1）诱导后的菌液加入磷酸缓冲液，超声波处理，然后加入大豆卵磷脂和橄榄油混匀，再超声波处理，冰上放置然后超声波处理，冰上放置，然后离心收集上层油体即为固定化脂肪酶LIPY7；
所述超声波的功率为30W、破碎时间为8s、间隔时间为8s，每次超声20个循环；所述污水处理环境温度为45℃，所述生活污水的pH为8.0。
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