[发明专利]一种用于胚胎干细胞培养的组合物及其应用

说明书

本发明提供一种用于胚胎干细胞培养的组合物，其能确保胚胎干细胞长期处于未分化状态并具有无限增殖的能力。其包括白血病抑制因子、转化生长因子β1、表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、Rho激酶抑制剂Y27632、MEK抑制剂和骨形态发生蛋白抑制剂Noggin。本发明还提供了包含该组合物的细胞培养液及其应用。

技术领域

本发明涉及细胞学领域，具体地，涉及一种用于胚胎干细胞培养的组合物及其应用。

背景技术

人类胚胎干细胞的成功分离培养建系是当今生命科学的重要进展，它是从人类早期植入前胚胎的内细胞团中分离而来的、能在体外适当条件下保持不分化并不断增殖的一种干细胞。理论上，它具有分化成机体所有细胞组织的潜能，被称为种子细胞。人们可以利用不同的培养条件将胚胎干细胞定向诱导分化产生大量不同类型的细胞来作为细胞移植、组织替代甚至器官克隆的细胞供体，为将来治疗人类诸多的难治性疾病提供无限的细胞来源。因此在将来的医学临床应用中前景广阔，成为21世纪生命科学中又一研究热点。

此外，人胚胎细胞还有诸多其他用途，比如，其作为基因治疗的载体，通过同源重组方式进行基因剔除或转基因将修饰基因导入到干细胞中，可达到基因治疗的目的:它可提供任何组织类型的正常人类细胞，为开发新药提供大量标本，而且可用于筛选药物、鉴定新药作用的靶基因位点、筛选用于组织再生基因治疗的基因。哺乳动物的胚胎干细胞则是生物医学研究中的重要工具和模型。高效的胚胎干细胞培养系统将促进基于干细胞的再生生物医学的研究和临床治疗。

胚胎干细胞的培养需要注意以下两点：一、确保胚胎干细胞处于未分化状态:二、确保胚胎干细胞具有无限增殖的能力。然而，现有的培养基还不能达到理想的效果。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种用于胚胎干细胞培养的组合物，其能确保胚胎干细胞长期处于未分化状态并具有无限增殖的能力。

本发明另一个要解决的技术问题是提供一种包含该组合物并能够适用于胚胎干细胞培养的细胞培养液。

为解决上述技术问题，本发明的一种用于胚胎干细胞培养的组合物，包括白血病抑制因子、转化生长因子β1、表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、Rho激酶抑制剂Y27632、MEK抑制剂和骨形态发生蛋白抑制剂Noggin，所述组合物中各成份的含量如下：

进一步地，所述基础培养液包括

其中非必需氨基酸由等浓度的丙氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸和酪氨酸组成。

更进一步地，所述组合物中各成份的含量如下：

更进一步地，所述组合物中各成份的含量如下：

更进一步地，所述组合物中各成份的含量如下：

更进一步地，所述组合物中各成份的含量如下：

更进一步地，所述组合物中各成份的含量如下：

更进一步地，所述组合物中各成份的含量如下：

更进一步地，所述组合物中各成份的含量如下：

更进一步地，所述组合物中各成份的含量如下：