[发明专利]一种用于防治结核病的结核多肽疫苗及其制备方法、应用

权利要求书

1.一种用于防治结核病的结核多肽疫苗，包括结核多肽和载体，其特征在于：

所述结核多肽由结核分枝杆菌Rv0180c蛋白81~100位氨基酸片段、Rv0227c蛋白261~280位氨基酸片段和Rv2004c蛋白281~300位氨基酸片段三种多肽组成；所述Rv0180c蛋白81~100位氨基酸片段为GLDKNKFDIRVVSPDEARRL；所述Rv0227c蛋白261~280位氨基酸片段为VSGTIVKETERANHYFARDP；所述Rv2004c蛋白281~300位氨基酸片段为AYRAVVRAKVECVRFSQGKP；所述载体为壳聚糖-脱氧胆酸偶联物；所述壳聚糖-脱氧胆酸偶联物与结核多肽的质量比为5.5：2.5，三种多肽的质量比为1：1：1；所述壳聚糖-脱氧胆酸偶联物由包括如下步骤的方法制得：将壳聚糖溶于乙酸水溶液，然后用甲醇稀释，得稀释液；在所述稀释液中依次加入脱氧胆酸、1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，混合后室温下反应20-28h，得反应混合物；将反应混合物倒入甲醇/氨溶液中，混匀后分离沉淀，将所述沉淀洗涤、干燥，即得；所述壳聚糖、脱氧胆酸和1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的质量比为20：85：62。

2.权利要求1所述的结核多肽疫苗的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：将所述壳聚糖-脱氧胆酸偶联物溶于PBS溶液中，制得偶联物溶液；将所述结核多肽的混合物溶于PBS溶液中，制得多肽溶液；将所述多肽溶液滴加到所述偶联物溶液中，混匀后于3-5℃静置2.5-3.5 h，分离沉淀，即得。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖-脱氧胆酸偶联物与结核多肽的质量比为5.5：2.5。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述偶联物溶液中壳聚糖-脱氧胆酸偶联物的终浓度为2.2-4.4mg/mL。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述多肽溶液中结核多肽的终浓度为5.0~10.0mg/mL。

6.权利要求1所述的结核多肽疫苗在制备预防或治疗结核病的药物中的应用。