[发明专利]一种清宫寿桃丸的药效物质基础研究方法

说明书

本发明提供了一种清宫寿桃丸的药效物质基础研究方法，属于中药技术领域，一种清宫寿桃丸的药效物质基础研究方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)针对清宫寿桃丸进行LC‑MSⁿ整体分析，对其中主要的化学成分进行结构鉴定，确定其中的系列成分种类；(2)分别建立系列成分的LC‑MS分析方法，并结合色谱保留时间、紫外吸收光谱特征、分子量以及多级裂解离子碎片信息等进行快速的结构鉴定。本发明一方面可以避免样品前处理方法，最大程度地保留样品中的原有成分；另一方面，相对于整体分析法来说，分别建立各系列成分的分析方法，在一定程度上降低质谱检测过程中的成分共流出效应和离子抑制效应等对成分质谱信号的抑制，从而有利于中药复杂物质体系的阐明。

技术领域

本发明涉及属于中药技术领域，具体是一种清宫寿桃丸的药效物质基础研究方法。

背景技术

作为几千年来中华民族的瑰宝，中医药对人民的健康和民族的繁衍生息起到了不可替代的作用。如何阐明这些宝贵遗产的化学成分及其生物活性，更好地服务于人类，对我们来说是重任在肩，任重道远。随着现代技术的发展，对中药作用机理和化学物质基础的研究也不断深入。然而，中药化学成分极其复杂，含有大量需要定性和定量的化学成分，并且在炮制、配伍过程中易发生动态变化，其产物可能与临床疗效密切相关。因此，中药化学成分的复杂性成为中医药发展和现代化的瓶颈。

当前，单纯依靠传统的提取、分离、结构鉴定三部曲的天然产物研究方法以及以活性追踪为核心的天然产物研究方法，虽然能比较系统、深入地研究天然药物中的化学成分或活性成分，但是耗时长、成本高、盲目性强，且无法获得天然药物中所有成分的结构信息，具有很多的局限性。因此，复杂物质体系分析方法的研究已成为药物分析领域的前沿课题之一。

上世纪九十年代后期成熟的液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)将优秀的分离能力与高灵敏度和高专属性的检测方法有机地结合，日益成为最强有力的中药物质基础研究手段之一。在现代分析技术中，其以快速、高灵敏、特异性和多信息的特点和能够最有效地与色谱等技术联用而受到科学家的重视。特别是近年来，随着电喷雾电离和基质辅助激光解吸电离等软电离质谱技术的出现，质谱在药物以及生命科学等诸多领域中的应用得到了极大地拓展。软电离质谱、串联质谱及与色谱的联用，结合高分辨质谱分析，在中药有效成分的结构确认方面具有其他分析技术不可比拟的优势，已经成为研究中药化学物质基础、阐述中药炮制原理及方剂配伍原则科学内涵的最佳方法之一。

但是，在中药常量和微量成分的检测和鉴定过程中，成分共流出和离子抑制是两个难以克服的问题。这也就是说，基于LC-MS技术的中药复杂物质体系分析仍然受制于常量和微量成分难以同时检测和鉴定等关键问题。近年来，尽管色谱分离填料的迅猛发展以及多维液相分离技术的普遍应用可以在一定程度上改善物质间的分离选择性，使离子辨认度与归属性增强，但过度的色谱分离可能会导致部分微量尤其是痕量成分浓度过低而被质谱检测器漏检，仍无法克服软电离技术中共流出物的离子抑制效应。同时，随着质谱仪检测速度和精度的提高，质谱产生的数据也急剧增加，如何正确高效地解析这些数据也成为中药物质基础研究领域中的一项重大挑战。因此，如何围绕“中药常量与微量成分检测与鉴定”和“海量质谱数据的快速解析”两个关键问题，构建适合于中药尤其是中药大复方中化学成分特点的策略与方法是当前的研究热点。

本发明研究对象清宫寿桃丸是由补肾阳的益智仁、补肾阴的熟地、阴阳双补的枸杞子、固肾涩精的分心木等十余种补肾中药精选配方组成，具有补肾生精，益元强壮的功效，可用于肾虚衰老所致头晕疲倦，记忆力衰退，腰膝酸软，耳鸣耳聋，眼花流泪，夜尿多，尿有余沥。由于其药味组成极其复杂，所含化学成分也相当丰富，阐明其物质基础具有重要的意义。在研究过程中，首先构建了中药化学成分结构鉴定策略来快速鉴定该复方中的化学成分：基于中药系列成分的结构鉴定策略，旨在通过提高原位色谱分离效果，使微量成分的浓度得到富集而被检测，期望能为中药复杂物质体系的分析及中药物质基础的研究提供方法学借鉴。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在提供一种清宫寿桃丸的药效物质基础研究方法。