[发明专利]一种氨基酸序列在识别气味化合物中的应用

权利要求书

1.如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列在识别气味化合物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述气味化合物为反-2-己烯醇、肉桂醛、苯乙酸甲酯、4-乙基苯乙酮、反-3-己烯醇和正辛醇中的至少一种。

3.能够编码如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列的核苷酸序列在识别气味化合物中的应用。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述气味化合物为反-2-己烯醇、肉桂醛、苯乙酸甲酯、4-乙基苯乙酮、反-3-己烯醇和正辛醇中的至少一种。

5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，所述核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

6.一种鉴别气味化合物的方法，其包括如下步骤：

1)将第一氨基酸序列和第二氨基酸序列在细胞或昆虫的触角中进行共表达，得到表达有气味受体二聚体的细胞或昆虫的触角；其中，第一氨基酸序列包括如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列，第二氨基酸序列包括如SEQ ID No.11所示的氨基酸序列；

2)通过测定所述细胞或昆虫的触角在用气味化合物刺激前后的细胞膜电位或神经元放电频率变化来判断所述气味化合物是否能够激活所述气味受体二聚体。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在步骤1)中，所述细胞为非洲爪蟾的卵母细胞；

优选地，在步骤1)中具体包括向非洲爪蟾的卵中导入第一核苷酸序列和第二核苷酸序列，之后培养所述非洲爪蟾的卵，得到表达有气味受体二聚体的非洲爪蟾卵母细胞；其中，所述第一核苷酸序列包括依次从5’到3’的第一核苷酸非编码序列，编码SEQ ID No.2所示的氨基酸序列的核苷酸序列和第二核苷酸非编码序列；第二核苷酸序列包括依次从5’到3’的第三核苷酸非编码序列，编码SEQ ID No.11所示的氨基酸序列的核苷酸序列和第四核苷酸非编码序列；

优选地，第一核苷酸非编码序列和第三核苷酸非编码序列独立地为SEQ ID No.8所示的核苷酸序列；

优选地，第二核苷酸非编码序列和第四核苷酸非编码序列独立地为SEQ ID No.9。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述第一核苷酸序列与所述第二核苷酸序列的质量比为0.8-1.2:1。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，在步骤2)中，将气味化合物溶于1×Ringer，得到气味化合物灌流液，将所述气味化合物灌流液加入到灌流管中，利用双电极电压钳系统测定所述表达有气味受体二聚体的非洲爪蟾卵母细胞经所述气味化合物灌流液刺激前后的电流值，根据经所述气味化合物灌流液刺激前后得到的电流值的差值判断所述气味化合物是否能够激活所述气味受体二聚体。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，在所述步骤2)中，1×Ringer的pH值为7.4-7.8，其包括如下组分：

9.5-9.7mM NaCl,0.15-0.25mM KCl,0.4-0.6mM MgCl₂-6H₂O,0.4-0.6mM HEPES,0.5-0.7mM CaCl₂。