[发明专利]一种顶端长丛生状种毛种子的去种毛方法和离体培养方法

说明书

本发明提供了一种顶端长丛生状种毛种子的去种毛方法，包括以下步骤：1)将顶端长丛生状种毛种子的丛生状种毛至基部切除，得到切除丛生状种毛的种子；2)将所述步骤1)得到的切除丛生状种毛的种子浸没于氯化钠溶液中，得到去种毛、干净饱满的种子；所述氯化钠溶液的质量浓度为10～16g/L。本发明将顶端长丛生状种毛种子的丛生状种毛去掉后，使在离体培养中，对种子的消毒更为彻底，大大降低了种子在离体培养时的污染率。

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，尤其涉及一种顶端长丛生状种毛种子的去种毛方法和离体培养方法。

背景技术

荒漠植物在干旱荒漠区生态恢复中有不可替代的作用。像其它旱生、沙生植物一样，沙生柽柳在长期适应干旱、沙埋、强光等外界环境条件形成了典型的沙旱生特征，因此有很强的适应性，其主要生境类型为流动和半流动沙地，是沙地植物群落的优势种和主要建群种。然而沙生柽柳结实量极少，种子卵状、较细、长约3～4mm，又小又轻、顶端丛生状种毛长5mm左右，种子成熟后易随风吹落挂在其它植物上或飘落到地面，难以萌发，导致沙生柽柳在野外自然条件下靠种子自身的力量难以繁殖更新，实生苗越来越少。另外，随着近年全球气候变暖，荒漠区降水区域变化很大，加上土地严重沙化、过度放牧，野生沙生柽柳资源遭到极大的破坏。因此，急需借助人工繁殖方法加快其种质资源的保护。而植物离体快繁利用无性繁殖的方法在保持植物优良特性的基础上，也可解决大多数植物自然条件下难以繁殖的问题。

种子是植物离体快繁初期进行无菌苗培养过程中被广泛采用的外植体材料。种子的的灭菌消毒是植物离体快繁的第一步，也是决定植物无性繁殖成功与否的关键。由于沙生柽柳种子既小又轻，且带有种毛，采摘后较大的空气流动容易使种子漂浮于空气中或粘附于操作台面、器皿及操作人员衣服上，造成操作室环境污染也造成种子大大浪费。

目前，国内尚无有关沙生柽柳或其它顶端长丛生状种毛种子的去种毛方法和离体培养方法的专利或研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种顶端长丛生状种毛种子的去种毛的方法，能够降低离体培养过程中的污染率。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种顶端长丛生状种毛种子的去种毛方法，包括以下步骤：

1)将顶端长丛生状种毛种子的丛生状种毛至基部切除，得到切除丛生状种毛的种子；

2)将所述步骤1)得到的切除丛生状种毛的种子浸没于氯化钠溶液中，得到去种毛、干净饱满的种子；所述氯化钠溶液的质量浓度为10～16g/L。

优选的，所述顶端长丛生状种毛种子在切除丛生状种毛前进行浸泡，所述浸泡包括：将顶端长丛生状种毛的种子原料与水混合，依次进行第一浸泡和第二浸泡；所述第一浸泡的温度为35～45℃，所述第二浸泡的温度为1～8℃。

优选的，所述第一浸泡的时间为3～5h，所述第二浸泡的时间为1～3h。

本发明还提供了一种顶端长丛生状种毛种子的离体培养方法，包括以下步骤：

a.将上述技术方案所述去种毛方法得到的去种毛种子进行消毒处理，得到消毒种子；

b.将所述步骤a得到的消毒种子置于离体培养基上进行培养。

优选的，所述消毒处理包括以下步骤：

I.将去种毛种子依次经乙醇溶液处理和无菌水冲洗，得到乙醇溶液处理后的种子；

II.将得到的乙醇溶液处理后的种子依次经氯化汞溶液处理和无菌水冲洗，得到消毒种子。

优选的，所述步骤I中乙醇溶液的体积百分含量为70～80％，所述乙醇溶液处理的时间为25～35s。