[发明专利]一种心型脂肪酸结合蛋白免疫检测试剂及其制备和检测方法

说明书

本发明涉及一种心型脂肪酸结合蛋白免疫检测试剂及其制备和检测方法，具体涉及一种心型脂肪结合蛋白免疫检测试剂及其制备和检测方法，包括：酶标心型脂肪结合蛋白、用于检测心型脂肪结合蛋白抗体‑酶标心型脂肪结合蛋白复合物的指示试剂。本发明的有益之处在于：本发明的均相免疫检测试剂可以方便、快速、准确的确定样本中心型脂肪结合蛋白的含量，并且可以在全自动生化分析仪同时测定多个样品，实现心型脂肪结合蛋白的高通量快速化测定，准确度高，特异性强，稳定性好，准确度和检测效率有了较大的提高。

技术领域

本发明涉及一种心型脂肪酸结合蛋白检测试剂及其制备和检测方法，具体涉及一种心型脂肪酸结合蛋白均相酶免疫检测试剂及其制备和检测方法。

背景技术

脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding protein，FABP) 是一组多源的小分子蛋白质，广泛分布于哺乳动物心、脑、骨、肠、肝、脂肪等多种细胞胞质，根据其组织特异性分为心型、脑型、肾型、肝型、肠型等九种类型。其中心型脂肪酸结合蛋白(Heart-type FattyAcid-Binding Protein，H-FABP)分布于心肌细胞，约占心脏全部可溶性蛋白质的4%～8%，主要参与心肌能量代谢调控，因其形态学及免疫学上的差异，使得其对心肌细胞具有高度特异性。H-FABP是由132个氨基酸组成的一种可溶性蛋白质，分子量约为15000，它大量存在于心肌组织中，对心肌损伤的诊断敏感性高，能灵敏的反映心肌损伤，1988年首次被发现可作为心肌损伤早期的标志物。由于其分子量小，特异性较好，心肌损伤及缺血时快速释放，被认为是有望成为早期诊断急性冠脉综合症(ACS)的代表—急性心肌梗死(AMI)的最佳检测指标之一。急性冠脉综合症发生后1~3h开始升高，6~8h达峰值，12~24h恢复正常，因此H-FABP可作为ACS早期诊断的重要标志物，同时H-FABP也是一种早期诊断AMI的心肌标志物，其特异性和敏感性均好于肌红蛋白(Mb)，在AMI的早期诊断、预测AMI的复发、推测AMI面积、监测AMI后再灌注是否成功、评估心力衰竭预后等方面应用广泛。

目前，体外定量测定心型脂肪酸结合蛋白主要有电泳法和免疫学方法测定。电泳法操作比较繁杂耗时，准确性和重复性差，不适合常规临床检验。免疫学方法包括免疫电泳、放射免疫、酶联免疫吸附试验、化学或电化学发光免疫法、荧光免疫法和免疫浊度法等。免疫电泳由于耗时较长，不适合高通量检测；放射免疫由于放射性污染的原因，已经基本被其他方法所取代；酶联免疫吸附试验以前自动化程度不高，所以重复性不是很好，目前随着自动化程度的普及，已经有了很大改善。化学或电化学发光免疫法、荧光免疫法由于需要特殊的设备，导致成本较高，使用范围受到一定的限制。散射比浊法必须在特种蛋白分析仪上进行，虽然精密度较好，但是使用受到了一定的限制。

目前市场上缺乏灵敏度高、特异性强的心型脂肪酸结合蛋白检测试剂，尤其是质量好的自动化检验试剂。

均相酶免疫检测法，以其检测速度快、操作简单、灵敏度高、特异性强且可以在全自动生化分析仪上实现对检测物质的高通量快速化检测的优点，开始得到越来越多的关注。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种既安全又可快速、高效、灵敏、准确的检测出待测样本中心型脂肪酸结合蛋白含量的心型脂肪酸结合蛋白均相酶免疫检测试剂及其制备方法，以及可以与各种类型的自动生化分析仪联用、对检测人员要求不高的心型脂肪酸结合蛋白均相酶免疫检测方法。

为了实现上述目标，本发明采用的技术方案是：

一种心型脂肪酸结合蛋白免疫检测试剂，其特征在于，包括：酶标心型脂肪酸结合蛋白、用于检测心型脂肪酸结合蛋白抗体—酶标心型脂肪酸结合蛋白复合物的指示试剂。

上述指示试剂选自酶试剂、放射性同位素试剂、荧光试剂或化学发光试剂。

前述的心型脂肪酸结合蛋白免疫检测试剂，上述指示剂选自酶试剂，包括：酶标偶联物和酶的底物；上述酶标偶联物包括葡萄糖脱氢酶—酶标抗原偶联物；上述酶的底物为葡萄糖。