[发明专利]一种CuInS/ZnS量子点及检测碱性磷酸酶的方法

说明书

本发明涉及生化检测技术领域，公开了一种CuInS/ZnS量子点及利用该量子点检测碱性磷酸酶的方法。以CuInS/ZnS量子点做为碱性磷酸酶水解4‑硝基苯磷酸二钠体系中的探针，在λex/λem＝405/588nm条件下测定荧光强度，通过荧光强度的变化以及碱性磷酸酶与荧光强度的线性关系，得到碱性磷酸酶的含量。本发明制备的CuInS/ZnS量子点最佳激发波长为405nm，与PNP的最大底物吸收峰重叠，能够产生内滤效应，从而达到检测ALP的目的。检测灵敏度高，抗干扰能力强，样品要求低，能够实现对血清样品的直接检测。

技术领域

本发明涉及半导体量子点合成、分析化学、生化检测技术领域，特别是涉及一种CuInS/ZnS量子点及利用该量子点作为纳米荧光探针检测碱性磷酸酶的方法。

背景技术

目前，临床检测血清中ALP采用的方法是比色法，此法以4-硝基苯磷酸二钠(PNPP)为底物，在ALP存在条件下，PNPP与ALP反应产生游离酚(对硝基苯酚PNP)和磷酸，酚在碱性溶液中与4-氨基安替比林作用，经铁氰化钾氧化形成红色醌类化合物，其红色深浅与ALP活性成正比。在37℃条件下，每100mL血清与底物作用15分钟，产生1mg酚的ALP活性为1个金氏单位(U)。以蒸馏水调零点，在510nm处读取各管吸光度(紫外分光光度计)。该方法对样品需要量大，样品前处理复杂，灵敏度低，选择性差，抗干扰能力不足。由于临床样品(如全血)中的复杂组分会对检测结果造成干扰，因此只能用于成分相对简单而显色又不易受到干扰的体系，检测前都需要对样品进行离心分离等预处理，并不能直接用于分析实际血液样品。底物溶液中不得含有酚类物质，血清样品需要量为100μL；检测下限未知。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种快速检测碱性磷酸酶的方法，该方法可以直接对人血清进行测定，每测一个样品仅需20μl血清，检测灵敏度高，抗干扰性强，操作简便，可实现快速测定。

本发明的另外一个目的还在于提供上述CuInS/ZnS量子点及其制备方法。

为了达到上述目的，本发明的技术方案如下：

一种CuInS/ZnS量子点的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将可溶性铜源化合物、铟源化合物及巯基脂肪酸与水混合，调节pH值至8～10，得到混合液；

所述混合液中，Cu²⁺和In³⁺的摩尔比为0.015～0.045：0.015～0.120；Cu²⁺和In³⁺的物质的量之和与巯基脂肪酸的摩尔比为0.03～0.06：0.24～0.90；

(2)搅拌条件下，将所述步骤(1)得到的混合液与硫源化合物混合，微波辅助加热使混合后溶液温度在4min以内升温至90～100℃，保持温度1～10min，得到含有CuInS核的反应液；

(3)待步骤(2)得到的反应液冷却至低于50℃后，向反应液中加入锌源溶液和硫源溶液，在90～100℃下微波加热反应1～10min，得到CuInS/ZnS量子点。

优选的，步骤(1)中，所述铜源化合物为碘化铜或氯化铜，所述铟源化合物为醋酸铟或氯化铟，所述巯基脂肪酸为主链长度为2～8个碳原子的巯基脂肪酸。

步骤(2)中，所述硫源化合物为Na₂S。

更优选的，步骤(1)中，所述Cu²⁺的摩尔含量为0.015～0.045mmol；步骤(2)中，所述Na₂S的摩尔含量为0.02～0.06mmol。

优选的，步骤(3)中，所述锌源溶液为Zn(Ac)₂溶液，所述硫源溶液为Na₂S溶液。