[发明专利]一种同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法

说明书

本发明公开了一种同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱‑串联质谱法，包括样品制备步骤：取畜禽肉组织制成肉泥，获取待测样品；提取剂制备步骤：取乙腈、水和甲酸，混合均匀得提取剂；样品提取步骤：称取待测样品，加入内标工作混合液；加入提取剂均质，进行离心分离，取上层清液；样品净化步骤：用Oasis PriMe HLB固相萃取柱进行萃取，再用提取剂洗涤固相萃取柱，合并流出液；接着进行氮吹，定容后，离心分离，取上层清液，过滤，获取测试液；测试步骤：测试液进行UPLC‑MS/MS测定。该方法能在15分钟内完成94种残留药物的检测，极大提高了检验工作效率，大大降低了人力，节约试剂耗材的使用，绿色环保。

技术领域

本发明涉及分析化学技术领域，尤其涉及一种同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法。

背景技术

畜禽在饲养的过程中，大部分都会使用到兽药，因此畜禽的体内一般会有兽药残留。而不同类别的兽药，其分子结构、 分子量、官能团不同，导致其化学性质大相径庭。所以常规检测方法大多数只能同时检验某一类或两类药物。而畜禽养殖过 程中往往是多类药物同时使用，所以在检验过程中往往是要采用多个不同的检验方法，这样既耗时又费力，检验人员的工作 量很大。例如，2017年浙江省农产品例行监测任务中，畜肉产品的药物残留检测项目为克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、 西马特罗、恩诺沙星(以恩诺沙星与环丙沙星之和计)、达氟沙星、氟甲喹、呋喃唑酮代谢物、呋喃它酮代谢物、呋喃西林 代谢物、呋喃妥因代谢物、多西环素(强力霉素)、土霉素、金霉素、四环素、林可霉素、红霉素、替米考星、氯霉素、甲 砜霉素、氟苯尼考、磺胺类(5种总量)、氯丙嗪、地塞米松、喹乙醇代谢物、庆大霉素、五氯酚酸钠，涉及12大类共30多 项，常规检验一般一天能做1-2个项目，因此完成一批样品需要用时2周，日常检测压力很大。

虽然目前也有了一些方法实现了多残留检测，但是相对来说，方法稳定性比较差，操作依然很繁琐，前处理的工作量依 然很大。往往采用的是用一种固定相去吸附目标化合物。而不同类别的兽药其化学性质大相径庭，导致检测结果的可靠性和 稳定性很差。

固相萃取(SPE)是目前大量且广泛应用于兽药残留检测的样品前处理技术，该技术利用目标化合物在溶液和吸附剂之间 的保留能力不同，会保留在保留作用高的吸附剂上的原理，从样品溶液中吸附目标化合物使其与溶液分离，再通过洗脱液洗 脱来分离与富集目标化合物。但是固相小柱也是有相对局限性，也只能适用于多种兽药的净化，而不能实现多类兽药的同时 净化。因此，畜禽中多兽药残留一直是业界研究的热点。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法，该 方法能够在15分钟内完成94种残留药物的检测，快速、灵敏、高效、稳定，极大的提高了检验检测工作的效率，大大降低 了检验过程的人工劳力，大大节约了试剂耗材的使用，绿色环保，节能。

本发明的目的采用如下技术方案实现：

一种同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法，包括：

样品制备步骤：取畜禽肉样品，去皮去骨后，取肉组织部分制成肉泥，获取待测样品，混匀封装后冷冻保存；

提取剂制备步骤：取乙腈、水和甲酸，混合均匀，获取提取剂；其中乙腈、水的体积比在75:25到90:10之间，甲酸的 体积为乙腈和水的体积之和的0.1-0.3％；

样品提取步骤：称取所述待测样品，置于离心管中，加入内标工作混合液；然后加入所述提取剂，摇匀，获取第一分析 液；将所述第一分析液进行离心分离，取上层清液，记为第一上层清液；

样品净化步骤：取所述第一上层清液，用Oasis PriMe HLB固相萃取柱进行杂质吸附，收集流出液，再用所述提取剂洗 涤所述固相萃取柱，合并流出液，获取第二分析液；接着，对所述第二分析液进行氮吹，定容后，离心分离，取上层清液， 记为第二上层清液，过滤，获取测试液；