[发明专利]一种同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法

权利要求书

1.一种同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法，其特征在于，包括：

样品制备步骤：取畜禽肉样品，去皮去骨后，取肉组织部分制成肉泥，获取待测样品，混匀封装后冷冻保存；

提取剂制备步骤：取乙腈、水和甲酸，混合均匀，获取提取剂；其中乙腈、水的体积比在75:25到90:10之间，甲酸的体积为乙腈和水的体积之和的0.1-0.3％；

样品提取步骤：称取所述待测样品，置于离心管中，加入内标工作混合液；然后加入所述提取剂，摇匀，获取第一分析液；将所述第一分析液进行离心分离，取上层清液，记为第一上层清液；

样品净化步骤：取所述第一上层清液，用Oasis PriMe HLB固相萃取柱进行杂质吸附，收集流出液，再用所述提取剂洗涤所述固相萃取柱，合并流出液，获取第二分析液；接着，对所述第二分析液进行氮吹，定容后，离心分离，取上层清液，记为第二上层清液，过滤，获取测试液；

测试步骤：所述测试液进行UPLC-MS/MS测定。

2.如权利要求1所述的同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法，其特征在于，在所述样品制备步骤中，所述肉组织部分采用绞肉机制成肉泥，获取待测样品，混匀后装入封口包装袋中，在-18℃以下冷冻保存，备用。

3.如权利要求1所述的同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法，其特征在于，在所述提取剂制备步骤中，乙腈、水和甲酸的体积比为80:20:0.1。

4.如权利要求1所述的同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法，其特征在于，在所述样品提取步骤中，准确称取待测样品2.0g，置于50mL离心管中，精确加入同位素内标工作混合液0.2mL，然后加入9.8mL所述提取剂，以12000r/min的速度匀浆2min，获取第一分析液；将所述第一分析液以10000r/min的转速在5℃的条件下，离心10min，取上层清液，记为第一上层清液。

5.如权利要求1所述的同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法，其特征在于，在所述样品提取步骤中，所述内标工作混合液的制备方法如下：精密移取0.050mL0.1mg/mL的内标储备液至20mL容量瓶中，用甲醇定容，获取浓度为250ng/mL内标工作混合液。

6.如权利要求1所述的同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法，其特征在于，在所述样品净化步骤中，取2mL所述第一上层清液，置于PriMe HLB固相萃取柱上，调节流速为1-2滴/秒，收集流出液，再用2mL所述提取剂洗涤所述固相萃取柱，合并流出液于刻度试管中，获取第二分析液；接着，用氮气将所述第二分析液吹至1.0mL以下，加入水定容至1.0mL，涡旋充分溶解残渣，以10000r/min的速度在5℃的条件下离心10min，取上层清液，记为第二上层清液，所述第二上层清液过0.22μm有机微孔滤膜，获取测试液。

7.如权利要求1所述的同时测定畜禽中10类94种残留药物的液相色谱-串联质谱法，其特征在于，在所述测试步骤中，色谱的测试条件如下：正离子模式下，采用Waters ACQUITYUPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1mm×100mm，1.7μm)；柱温30℃，样品温度为15℃，进样体积为2μL，流速为0.35mL/min；流动相A为：5mmol/L乙酸铵水溶液和甲酸的混合液，流动相B为：5mmol/L乙酸铵甲醇溶液和甲酸的混合液，梯度洗脱；

负离子模式下，采用Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1mm×100mm，1.7μm)，柱温30℃，样品温度为15℃，进样体积为2μL，流速为0.30mL/min；流动相为甲醇水溶液，其中甲醇和水的体积比为40：60，等度洗脱。