[发明专利]一种快速检测粮食中手性三唑醇的方法

说明书

本发明公开了快速检测粮食中手性三唑醇的方法，利用超高效合相色谱仪串接三重四级杆质谱仪同时快速检测粮食中手性三唑醇。待测样品经80％的乙腈超声萃取后，通过超高效合相色谱仪进行梯度洗脱和分离，分离后通过三重四级杆质谱仪进行检测。本发明方法简单快捷、准确可靠，能够准确地对粮食中的三唑醇进行定性、定量分析，为粮食中三唑醇的准确判定、快速检测提供科学依据。

技术领域

本发明涉及检测技术领域，具体地说是一种利用超高效合相色谱串接三重四级杆质谱仪同时快速检测粮食中手性三唑醇的方法，属于粮食农药残留分析技术领域。

背景技术

三唑醇为高效、低毒、低残留的内吸性杀菌剂，主要用于防治禾谷类作物的白粉病和黑粉病，如防治小麦散黑穗病、网腥黑穗病、根腐病、大麦散黑穗病、锈病、叶条纹病、网斑病等。三哇酮在植物体内代谢为L-三唑醇。当前关于L-三唑醇和D-三唑醇的检测方法多数只对其中的一种农药进行检测，而且检测步骤较多，检测时干扰较大。玉米以及高粮主要干扰物为釉脂、色素。使用现有的气质联用仪检测，这些高沸点的物质沉积在进样口和柱头中，占据活性位点，从而导致色谱分离能力降低，同时产生基质增强效应。而有效去除油脂、色素的干扰、保证三种化合物的回收率具有一定的难度。

目前的进出口标准采用气相色谱质谱联用法检测。其中，气相-质谱联用法不稳定，操作费时、步骤多，且使用的试剂有毒且易挥发，不利于人体健康。有文献报道使用正相溶剂测试三唑醇，但是由于三唑醇的性质，使用MRM质谱定量，手性三唑醇使用正相溶剂将面临正相溶剂质谱兼容性差的问题，目前使用溶剂分析手性化合物，还面临不能走梯度、分析时间长、分离度不佳、方法重现性差等问题，且分析成本高，分析用试剂有毒且易挥发，不利于人体健康。

发明内容

本发明旨在提供一种快速检测粮食中手性三唑醇的方法，采用超高效合相色谱仪串接三重四级杆质谱仪同时快速检测粮食中手性三唑醇(L-三唑醇、D-三唑醇)，本发明方法可以为粮食中三唑醇检测的准确判定、快速检测提供科学依据。

本发明通过超高效合相色谱仪串接质谱检测器检测(UPC²-MSMS)，本发明测试方法的灵敏度满足酒类样品低限量检测要求，同时该检测器使用方便，即插即用，能够快速的检测粮食中两种手性三唑醇的异构体。

本发明测试方法所用仪器为：超高效合相色谱仪(配有三重四级杆质谱仪)；Daicel Chiralpak IC-3 4.6x150mm；涡旋仪；超声仪；移液枪。

本发明快速检测粮食中手性三唑醇的方法，包括如下步骤：

步骤1：前处理

准确量取1.0g待测样品于10ml塑料离心管中，加入9ml 80％乙腈溶液，涡旋1min，使用超声仪超声10min，10000转/分钟离心5min，0.22um滤膜针头过滤器过滤，待进样；

步骤2：测试参数的设定

2a、超高效合相色谱仪的测试参数

色谱柱：Daicel Chiralpak IC-3 4.6x150mm；柱温：30～45℃；

样品室温度：10～20℃

流动相：二氧化碳(A相)+甲醇(B相)；流速：2～3mL/min；洗脱方式：梯度洗脱；进样模式：直接进样(Loop环进样)；时间：2min；ABPR压力：2000psi；

所述梯度洗脱的参数为：初始梯度甲醇的浓度为5vt％；1min时甲醇的浓度升至20vt％；1.5min时甲醇的浓度降至5vt％并保持至2min，即完成一个梯度的洗脱。

2b、ACQUITY TQD质谱检测器的测试参数

离子化方式：ESI+；