[发明专利]一种ProGRP含量测定用液态校准品

说明书

本发明公开了一种ProGRP含量测定用液态校准品，包括以下组分：缓冲液10~200mmol/L，防腐剂0.1~0.5%（w/v），蛋白质类稳定剂1~5%（w/v），糖类稳定剂5~10%（w/v），EDTA 1~5%（w/v）,表面活性剂0.1~0.5%（w/v），ProGRP抗原0~5000pg/mL，抑肽酶1~10mg/L。本发明的优点在于不用冻干，使用时也无需复溶，减少了复溶过程中可能出现的不可控因素，使得临床检测结果更为准确。由于其中添加了糖类稳定剂、金属蛋白酶抑制剂（EDTA）、抑肽酶等成份，有效地提高了ProGRP蛋白的稳定性，使得制备的ProGRP液态校准品稳定性较好，可在2‑8℃冷藏稳定保存12个月。

技术领域

本发明涉及医学检验领域，尤其是涉及一种用于胃泌素释放肽前体（ProGRP）含量测定用液态校准品。

背景技术

胃泌素释放肽（GRP）是由McDonald等在1978年从猪的胃组织细胞中分离出来的一种具有促胃泌素分泌作用的胃肠道激素，由27个氨基酸组成，是有效的促分泌素或调节肽，广泛分布于哺乳动物的胃肠道神经系统和肺呼吸道。肺癌的癌细胞本身亦可产生并分泌GRP，以自分泌的方式调节自身的生长，并且也可以通过局部弥散的方式与周围的肿瘤细胞膜上相应的受体结合，刺激肿瘤的生长。低水平GRP即可刺激小细胞肺癌（SCLC）细胞DNA合成，因而GRP被认为是SCLC的自主生长因子。但由于GRP很容易被肽链端解酶快速降解，活性部分在血中不稳定，从血浆中直接提取可靠的GRP较困难，因而难以在临床上应用。

ProGRP是GRP的前体结构，普遍存在于非胃窦组织神经纤维脑和肺的神经内分泌细胞中，ProGRP根据其部分氨基酸的变异，可分为3种生物大分子，它们具有共同的羧基末端序列31-98，能够在血浆中稳定表达ProGRP，是GRP基因编码的产物。

研究证实ProGRP羧基末端序列31-98水平能够代表GRP水平和GRP基因表达，是一种新的肿瘤标志物。特别是针对于小细胞型肺癌，ProGRP和NSE（神经元特异性烯醇化酶）检测SCLC的敏感性分别为73%和60%，特异性分别为98%和92%，但是NSE诊断早期SCLC的敏感性仅36.84%，而ProGRP诊断早期SCLC的敏感性可达63.16%。此外，ProGRP较NSE有一个更大的优势，就是样本检验结果不受溶血的影响。由此可见ProGRP对SCLC诊断的特异性、敏感性尤其是SCLC的早期诊断比NSE更好；在对其他癌症方面诸如非小细胞肺癌、胃肠肿瘤、小细胞食管癌、卵巢癌等的诊断和监测也有重要意义。通过动态监测，可辅助判断疾病的进程、治疗效果和复发。

2017中国癌症登记年报显示，肺癌是近年发病率和死亡率最高的癌症。通过免疫检测定量测定人血浆和血清中的ProGRP含量，可辅助用于小细胞肺癌的早期诊断、疾病进程检测、治疗效果评价及复发监测等。目前，国内外知名的体外诊断试剂生产商（如罗氏、康乃格等）提供的ProGRP校准品主要是冻干品，不仅价格昂贵，而且冻干校准品存在以下缺点：a. 复溶给操作者带来了一定麻烦；b. 复溶过程中，水质差异及人为操作误差可能导致校准品复溶后的浓度与靶值有偏差，从而造成临床检测结果的不准确； c. 校准品复溶后不易保存、保存时间短。

发明内容

本发明的目的在于提供一种稳定的ProGRP含量测定用液态校准品，该液态校准品在2~8℃冷藏条件下能保存1年，对ProGRP的测定具有良好的检测性能。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的ProGRP含量测定用液态校准品，包括以下组分：

缓冲液10~200mmol/L，防腐剂0.1~0.5%（w/v），蛋白质类稳定剂1~5%（w/v），糖类稳定剂5~10%（w/v），EDTA 1~5%（w/v）,表面活性剂0.1~0.5%（w/v），ProGRP抗原0~5000pg/mL，抑肽酶1~10mg/L。