[发明专利]一种纳米四氧化三铁定向固定化脂肪酶的方法

权利要求书

1.一种纳米四氧化三铁定向固定化脂肪酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）采用水热法合成纳米四氧化三铁，采用硅烷偶联剂及戊二醛对所述纳米四氧化三铁进行修饰；

（2）将脂肪酶和界面激活剂溶解于缓冲溶液中得到固定化溶液，将修饰后的纳米四氧化三铁作为载体加入到固定化溶液中进行固定化反应；

所述界面激活剂为蔗糖酯SE-11；界面激活剂的浓度为2~5%；缓冲溶液的pH为5~7；

（3）固定化反应结束后，向固定化溶液加入戊二醛进行交联，交联结束后分离、洗涤、干燥，得到固定化脂肪酶。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）包括：

（1-1）将二价铁盐和三价铁盐溶解于去离子水中并加热至60~100℃，在惰性气体保护下加入氨水使铁盐水溶液的pH至10~11，保温反应，得到纳米四氧化三铁；

（1-2）将纳米四氧化三铁加入到乙醇水溶液中，再向乙醇水溶液中加入硅烷偶联剂对纳米四氧化三铁进行修饰，得到氨基化的纳米四氧化三铁；

（1-3）采用戊二醛水溶液对氨基化的纳米四氧化三铁进行修饰，得到表面带有醛基纳米四氧化三铁。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（1-2）中，所述的硅烷偶联剂为3-氨丙基-三乙氧基硅烷，纳米四氧化三铁与3-氨丙基-三乙氧基硅烷的质量比为1:1~4。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中，脂肪酶的量以有效成分脂肪酶蛋白的质量计，固定化溶液中，脂肪酶的浓度为1~12mg/ml。

5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于，脂肪酶的量以有效成分脂肪酶蛋白的质量计，固定化溶液中，脂肪酶与载体的质量比为1:10~50。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，固定化时间为1~12h。