[发明专利]一种用超声波与沉淀结合法提取猪小肠粘膜中的肝素钠方法在审
申请号: | 201711338664.9 | 申请日: | 2017-12-14 |
公开(公告)号: | CN109957044A | 公开(公告)日: | 2019-07-02 |
发明(设计)人: | 刘乃山;迟培升;姜德志 | 申请(专利权)人: | 青岛九龙生物医药集团有限公司 |
主分类号: | C08B37/10 | 分类号: | C08B37/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 猪小肠粘膜 肝素钠 超声波 吸附 沉淀 传统提取 乙醇量 再使用 树脂 提纯 超声 收率 洗脱 效价 洗涤 | ||
1.一种新的提取猪小肠粘膜中的肝素钠的方法;其特征在于:先使用树脂将猪小肠粘膜中的肝素钠吸附出来,再使用超声波对其进一步提纯,最后用乙醇沉淀。
2.根据权利要求1所述的方法;其特征在于:提取猪小肠中的肝素钠采用如下步骤:(1)吸附:称取一定质量的猪小肠黏膜,置反应罐中,加1倍质量的纯化水稀释,用30%的氢氧化钠溶液调节pH 值至9.0~9.5,加热至沸腾,保持10~15分钟,同时捞去液体上的杂物;缓慢降温至35 ℃~45 ℃,用在出水口处系有一100目尼龙布袋的耐高温的塑料软管将液体虹吸至反应池中,调节食盐波美度为3.2~3.5,PH值为8.0,按反应池中液体量加入6%的D204肝素钠专用树脂,保温搅拌吸附8~10小时;(2)洗涤与洗脱:吸附完毕后,静置30分钟,过滤,收集树脂,并用纯化水将树脂漂洗干净,沥干,加入1.2 mol/L 氯化钠溶液洗涤2小时,沥干后,加入4 mol/L 氯化钠溶液1倍量,搅拌洗脱5小时,沥干后再洗脱2次,每次加入4mol/L 氯化钠溶液的量减半,洗脱时间分别为2小时和1小时;
合并全部洗脱液;(3)超声:将频率可调超声波发生器的频率调节至45000~47000赫兹后,对上一步的洗脱液使用超声波手段处理,用双层纱布过滤后,再用超声波二次处理使杂蛋白分离;(4)沉淀:按比例在滤液中加入1.5倍95%的乙醇,充分搅拌后,静置12小时以上,虹吸上层乙醇,沉淀物分别用95%的乙醇、丙酮脱水2次,真空干燥,得肝素钠粗品。
3.根据权利要求2所述的方法;其特征在于:在树脂吸附时,按反应池中液体量加人6%的D204肝素钠专用树脂,保温搅拌吸附8~10小时。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:在超声时,使用频率为45000~47000赫兹超声波。
5.根据权利要求4所述的内容,其特征在于:在超声时,使用频率为46317赫兹超声波。
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