[发明专利]一种负载紫杉醇的苦杏仁蛋白纳米载体及其制备方法有效
申请号: | 201711333612.2 | 申请日: | 2017-12-14 |
公开(公告)号: | CN109956995B | 公开(公告)日: | 2023-07-28 |
发明(设计)人: | 周建武;林岱;饶平凡 | 申请(专利权)人: | 浙江工商大学 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;A61K31/337 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 320018 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 负载 紫杉醇 苦杏仁 蛋白 纳米 载体 及其 制备 方法 | ||
1.一种苦杏仁蛋白,其特征在于:所述苦杏仁蛋白的N-端一级结构序列为ARQSQLSPQNAYQLVQQQAR;所述苦杏仁蛋白的制备方法如下:
1)苦杏仁饮片经高速粉碎机粉碎,经丙酮按料液比1:10 脱脂后,以质量比1:20将脱脂粉末与去离子水混合,室温搅拌1h,再6000g离心10min,收集上清液,沉淀用去离子水重悬后再次重复提取步骤,将两次上清液混合后经0.45μm水系滤膜抽滤,滤过液即为苦杏仁蛋白粗提液;
2)将1mL苦杏仁蛋白粗提液流加至以Tris-盐酸缓冲液平衡Macro-Prep® High-Q色谱柱,以Tris-盐酸缓冲液继续平衡3倍柱体积后,再以含0~0.3mol/L NaCl的Tris-盐酸缓冲液线性梯度洗脱130mL,最后用含0.3mol/L NaCl的Tris-盐酸缓冲液洗脱1个柱体积,流速1.0mL/min,紫外分光光度计测量波长为280nm,收集洗脱峰SP1,即为苦杏仁蛋白初步分离液;
3)将50μL苦杏仁蛋白初步分离液流加至以磷酸盐缓冲液平衡TSK-GEL G6000 PW凝胶色谱柱,以磷酸盐缓冲液等度洗脱30mL,流速0.5mL/min,紫外分光光度计测量波长为280nm,收集洗脱峰SP2,即为苦杏仁蛋白组分;
其中,所述Tris-盐酸缓冲液的浓度为0.02mol/L、pH为8.1,所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.05mol/L、pH为7.4。
2.一种如权利要求1所述的苦杏仁蛋白在制备蛋白纳米载体上的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述蛋白纳米载体的制备方法为:将苦杏仁蛋白配制为1mg/mL的0.02mol/L、pH9.0 Gly-NaOH盐溶液,经过95℃加热10min,经5000g超滤30min,即获得苦杏仁蛋白纳米载体。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述蛋白纳米载体用于装载紫杉醇。
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