[发明专利]一种生物组织光透明剂、光透明化方法及其应用

说明书

本发明公开了一种生物组织光透明剂、光透明化方法及其应用，属于生物成像技术领域。所述光透明剂是包含甲酰胺，以及醇类物质溶于水中形成的混合溶液，所述甲酰胺、水以及醇类物质的体积百分比分别为15％‑40％、15％‑30％以及30％‑70％。该生物组织光透明剂在生物组织光透明化处理中的应用。使用该光透明剂进行生物组织光透明化的处理方法，包括：将待处理生物组织进行分离并固定；使用所述光透明剂浸泡所述待处理生物组织，直至所述待处理生物组织变得透明。本发明的光透明剂能在几小时至2天内使不同生物组织变得透明、提高成像深度，透明时间短且保留样本的荧光信号，为获取组织内部神经元、血管及其他结构信息提供了新的方法。

技术领域

本发明涉及生物成像技术领域，特别涉及一种生物组织光透明剂、光透明化方法及其应用。

背景技术

不断发展的光学成像技术及标记技术，为高分辨获取生物组织的三维微观结构提供了重要的研究工具。然而，大多数生物组织是混浊的，对光具有高散射特性，这使得光学成像技术的成像深度十分有限，仅能对较薄的组织进行成像，且图像质量随深度逐步降低，限制了在大组织成像的应用研究。

近年来不断涌现的生物组织光透明技术，通过多种策略减小组织散射，有效增加了光学成像的深度。与多种显微光学成像技术的结合，已能够实现大组织的深层成像，为生命科学的研究，如神经科学、发育学等的研究提供了重要的研究方法。现有的组织光透明方法，主要包括两类，一类是基于有机溶剂的方法，利用四氢呋喃或醇类进行脱水，再利用二苄醚等进行折射率匹配，这种方法具有较好的透明效果，但容易淬灭样本的荧光；还有一类是基于水溶液试剂的方法，利用尿素的水合作用或表面活性剂等试剂的脱脂作用，增加组织各成分的折射率匹配程度，从而减小组织散射，增加透明度，这类方法能够较好的保存荧光，但多数需要较长的透明时间。

发明内容

本发明的目的是提供一种生物组织光透明剂、光透明化方法及其应用，该光透明剂能在短时间内使生物组织变得透明、且保留样本的荧光信号。

一方面，为实现上述目的，本发明提供了一种生物组织光透明剂，所述光透明剂是包含甲酰胺，以及醇类物质溶于水中形成的混合溶液，所述甲酰胺、水以及醇类物质的体积百分比分别为15％-40％、15％-30％以及30％-70％。

进一步地，所述光透明剂为一种配比的甲酰胺、水以及醇类物质的混合溶液；或者，所述光透明剂为两种或两种以上不同配比的甲酰胺、水以及醇类物质的混合溶液。

进一步地，所述醇类物质为多元醇。

进一步地，所述醇类物质为三乙醇胺、N，N，N′，N′-四(2-羟基丙基)乙二胺、甘油或山梨醇中任意一种或几种。

另一方面，本发明还提供了一种生物组织光透明剂在生物组织光透明化处理中的应用。

进一步地，所述生物组织为软组织。

另一方面，本发明还提供了一种生物组织光透明化的处理方法，包括：

将待处理生物组织进行分离并固定；

使用所述光透明剂浸泡所述待处理生物组织，直至所述待处理生物组织变得透明。

进一步地，所述光透明剂为一种配比的甲酰胺、水以及醇类物质的混合溶液；或者，

所述光透明剂为两种或两种以上不同配比的甲酰胺、水以及醇类物质的混合溶液；其中，

当使用两种或两种以上不同配比的光透明剂浸泡所述待处理生物组织时，按照在不同配比的光透明剂中甲酰胺浓度逐渐降低、醇类物质浓度逐渐增加的次序，依次进行浸泡处理。

进一步地，所述生物组织为软组织。

进一步地，所述浸泡的时间在2天以内。