[发明专利]一种具肿瘤靶向性的纳米复合物Apt-PAMAM/ERL/SUV及其制备和应用

说明书

本发明公开了一种具有肿瘤靶向性的适配体修饰药物基因共输送纳米粒的制备方法及其在制备抗EGFR突变型肺癌药物中的应用。其具体制备方法为：先将Apt羧基活化，将其与PAMAM表面的氨基反应，合成Apt‑PAMAM运载体，包载药物ERL，形成Apt‑PAMAM/ERL纳米药物，再与SUV复合，从而构建一种具肿瘤靶向性的纳米复合物。该复合物克服了ERL水溶性差的缺陷，同时利用其表面所修饰的Apt和ERL双重靶向EGFR突变肿瘤细胞，增加对肿瘤组织的靶向性，通过与SUV复合，沉默抗凋亡基因Survivin的表达，逆转细胞对ERL的耐药性，从而有效地提高了药物的生物利用度，提升其临床应用价值。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种具有肿瘤靶向的适配体修饰药物基因共输送纳米粒的制备方法及其在EGFR突变型肺癌中的作用。

背景技术

肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺癌分为小细胞肺癌（SCLC）和非小细胞肺癌（NSCLC），其中NSCLC约占所有肺癌的85%，且表皮生长因子受体（EGFR）突变率高达40%（Ettinger DS, Bepler G, Bueno R, Chang A,Chang JY, Chirieac LR, et al. Non-small cell lung cancer clinical practiceguidelines in oncology. Journal of the National Comprehensive Cancer Network: JNCCN. 2006;4:548-82）。随着分子遗传学研究的不断进展，利用肿瘤细胞与正常细胞之间分子生物学上的差异，多种分子靶向药物被成功研发。EGFR酪氨酸酶抑制剂（EGFR-TKI）使中晚期NSCLC的治疗从标准含铂双药的化疗时代进入靶向治疗时代，以吉非替尼和ERL为代表的第一代EGFR-TKI已成为EGFR敏感突变阳性患者的一线首选治疗药物，然而遗憾的是所有接受TKI治疗的患者最终会出现耐药（Pi C, Zhang YC, Xu CR, Zhou Q. Precisiontreatment after resistance to first-generation EGFR-TKI in patients with non-small cell lung cancer. Chinese journal of oncology. 2017;39:94-7）。

现有研究表明，凋亡基因的突变会衰减EGFR-TKI的作用。抑制原癌基因依赖性通路和其旁路，可以有效地改善EGFR-TKI的耐药性（Santarpia M, Gil N, Rosell R.Strategies to overcome resistance to tyrosine kinase inhibitors in non-small-cell lung cancer. Expert review of clinical pharmacology. 2015;8:461-77）。生存素（Survivin）是凋亡抑制基因家族中分子量最小，抗凋亡作用最强的成员，在各种恶性肿瘤中高度表达。Survivin在肿瘤组织中的特异性表达和功能，使其成为肿瘤研究的新靶点（Okamoto K, Okamoto I, Okamoto W, Tanaka K, Takezawa K, Kuwata K, et al. Roleof survivin in EGFR inhibitor-induced apoptosis in non-small cell lungcancers positive for EGFR mutations. Cancer research. 2010;70:10402-10）。目前有很多改善EGFR-TKI获得性耐药的方法如紫杉醇联合参一胶囊与EGFR-TKIs（CN104306386A）、双胍类药物与EGFR-TKI的复合物（CN103316344A）等都被开发出来。但还没有通过联合EGFR-TKIs和抑制凋亡基因survivin的表达来逆转EGFR-TKI获得性耐药。