[发明专利]一种检测水产品中氯霉素残留的方法

说明书

本发明属于水产品检测技术领域，具体涉及一种检测水产品中氯霉素残留的方法，本发明建立了使用液相色－串联质谱联用仪测定水产品中氯霉素的含量，线性范围在0.5‑10ng/mL，添加平均回收率为92.3％‑97.5％，相对标准偏差为2.2％‑6.4％。该方法解决了深加工水产品中氯霉素的检测问题，同时又能满足鲜活水产品中氯霉素的残留检测。HLB固相萃取柱净化样品，提高了净化效果和回收率，减少了对色谱柱及环境的污染，既满足国内外对水产品中氯霉素残留的限量要求，又能用于加工水产品中氯霉素的检测和确证。

技术领域

本发明属于水产品检测技术领域，具体涉及一种检测水产品中氯霉素残留的方法。

背景技术

水产品种类繁多，营养丰富，广受消费者喜爱。近些年来，随着养殖规模的不断扩大，水产养殖病害日益严重。盲目用药、使用人药、过量用药等滥用药物现象比较普遍，这易造成养殖环境的恶化污染，也可能引起药物在水产品体内的残留，进而影响到食用者的身体健康。

氯霉素是一种广谱抑菌抗生素，曾长期在国内外广泛应用于水产养殖业的细菌性疾病治疗。食用水产品中的氯霉素可以通过食物链在人体内累积，从而威胁人类健康，氯霉素对人体的造血功能有一定的毒副作用，可以引发再生障碍性贫血，血小板减少等(万译文,邓克国,刘丽,等.高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的残留量[J].分析实验室,2013,32(5):84-87)。欧盟等许多国家和地区已经禁止氯霉素的使用，我国《无公害食品水产品中渔药残留限量》中规定水产品中不得检出氯霉素；农业部235号公告《动物性食品中兽药最高残留限量》规定动物性食品中不得检出氯霉素。

检测水产品中氯霉素的方法有很多，一种方法是使用气-质联用技术，检出限可以达到1μg/kg。而采用GB/T20756-2006《可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定》，液相色谱-串联质谱，检测限可以达到0.1μg/kg，水产品中氯霉素含量≥0.1μg/kg认为检出。此外还有高效液相法，酶联免疫法等。这些定量检测方法中，被国际公认仍是色谱法，主要有气相色谱法和液相色谱法，这两种方法的优点是重复性好，灵敏度高，结果更准确，缺点是样品在前处理时所用时间长，成本较高，检测速度较慢，试验过程非常复杂。国家水产品质量监督检验中心目采用酶联免疫法对样品进行定性初筛，然后用气象色谱仪及GC-MS联用技术进行确认及定量分析，两种方法相结合，虽然可有效降低劳动强度，并能保证检测结果的准确性，但酶联免疫法重复性差，容易出现假阳性，气相色谱法方法繁琐，检测耗时长，且这些方法主要针对新鲜水产品及简单加工的水产品效果较好，针对深加工的水品检测效果不好。

因此建立一种灵敏、高效、选择性好的分析方法用于检测水产品中氯霉素素具有重要的现实意义。

发明内容

本发明为了解决以上问题，提供了一种检测水产品中氯霉素残留的方法。

具体通过以下技术方案实现：

一种检测水产品中氯霉素残留的方法，包括以下步骤：

1)粉碎：取待检测产品，粉碎，待用；

2)提取：称取步骤1)处理的样品，于离心管中，加入2倍样品质量的提取溶剂，超声处理，离心，取上清，沉淀中加入提取溶剂再次提取，离心，合并两次上清液，定容，取1/4-1/5液体旋转干燥，得固体1；在对样品进行提取之前进行基质加标实验，称取5g无氯霉素残留的样品于离心管中，加入500μL质量浓度为10.0ng/mL的氯霉素内标溶液，10ml提取溶剂，超声处理，离心，取上清，沉淀中加入提取溶剂再次提取，离心，合并两次上清液，定容，取1/4-1/5液体旋转干燥，得固体2；