[发明专利]一种规模化的卵黄抗体提取方法

说明书

本发明公开了一种规模化的卵黄抗体提取方法，包括如下步骤：将高免鸡蛋消毒后进行卵黄分离；将分离的卵黄搅拌成糊状后加入注射用水，卵黄与注射水的体积比为1：1.5‑1：3；再将卵黄液体的PH值调整为5.0‑5.2；再加入浓度为1.5‑3％的辛酸溶液，搅拌均匀后静止2‑3h将卵黄液体进行过滤，当80％的下层清液过滤完毕后，将剩余的液体进行均匀搅拌后继续进行过滤，收集滤液；再加入适量的注射用水对滤液进行稀释得到清液，再将清液的PH值调整为6.0‑7.0，再加入终浓度为0.05％的甲醛溶液，将清液进行再次过滤，收集滤液进行分装后进行检验，检验合格之后贴标转入成品库。本发明使得卵黄抗体的生产周期明显缩短、生产成本降低、产品的纯度更高和延长的产品的保质期。

技术领域

本发明涉及卵黄抗体提取领域，尤其是涉及一种规模化的卵黄抗体提取方法。

背景技术

卵黄抗体(yolk antibody,IgY)是产蛋鸡受到抗原刺激后B细胞分化成浆细胞、分泌特异性抗体进入血液循环并在卵黄中积聚而成，提取的卵黄抗体可用于相应疾病的预防和治疗。

现在卵黄抗体的提取有如下几种方法：1、氯仿抽提法，由于该方法的氯仿用量极大，不仅导致卵黄抗体提取的成本高，并且得到的卵黄抗体产品的纯度低，并且氯仿具有较强的毒性；2、酸化水提取法，该方法产品的杂质多、性能极不稳定、应激性大，需要进行进一步浓缩操作才能使用，并且给动物注射后容易产生过敏反应，会导致动物出现病症，产品的安全性差；3、聚乙二醇法，聚乙二醇的用量大，使得卵黄抗体的提取成本高；提取的卵黄抗体产品的纯度也较低；因此上述三种方法只能在实验室中使用，无法采用上述方法对卵黄抗体进行大规模提取。现在卵黄抗体大规模提取的方法都是采用国家标准工艺进行提取，虽然国家标准提取工艺能够获得形状较为稳定的卵黄抗体产品，产品的安全性得到提高，但是采用国家标准工艺提取卵黄抗体的生产周期较长、生产成本高，并且现在的卵黄抗体产品还含有较多的杂蛋白，纯度不高，另外现在的卵黄抗体产品的保质期为18个月，相较而言，保质期的时间较短。

发明内容

针对现有技术中的上述问题，本发明提出了一种规模化的卵黄抗体提取方法，解决了现有的卵黄提取方法获得的卵黄抗体产品的生产周期较长、生产成本高、产品中含有较多杂蛋白使得产品的纯度不高以及产品的保质期较短等技术问题。

本发明的技术方案为：一种规模化的卵黄抗体提取方法，包括如下步骤：

1)将高免鸡蛋用0.1％的新洁尔灭消毒液浸泡消毒15min，再用甲醛熏蒸消毒30min；

2)将消毒后的高免鸡蛋进行手工或者机械打蛋操作，将卵黄进行分离；

3)将步骤2)中分离得到的卵黄转入搅拌罐中，将卵黄搅拌成糊状，再向搅拌罐中加入注射用水，卵黄与注射水的体积比为1：1.5-1：3；继续搅拌25-35min，搅拌速度为450-550r/min，搅拌完毕之后；再向卵黄中逐步滴加适量的醋酸-醋酸钠缓冲液至PH值为5.0-5.2时，停止滴加；

4)向步骤3)中得到的卵黄中加入适量浓度为1.5-3％的辛酸溶液，添加完毕后进行搅拌，搅拌速度为280-320r/min，在室温条件下静止2-3h将卵黄液体进行分层，即上层为卵黄脂蛋白固态物，下层为含有卵黄抗体的清液；

5)在容器的顶面上设置有过滤装置，过滤装置的透气量为17-19L/m²·s，搅拌罐底部出口处连接有管道至容器上方，打开搅拌罐底部阀门，同时对搅拌罐进行加压至压力为0.05-0.1MPa，下层清液在过滤装置中过滤，当80％的下层清液过滤完毕之后，将搅拌罐底部的阀门关闭，同时开启搅拌电机将搅拌罐内的卵黄脂蛋白固态物和剩余20％的下层清液搅拌进行均匀混合；关闭搅拌电机，再向搅拌罐加压使罐内压力维持在0.1-0.15MPa之间，再打开阀门，将搅拌罐内的卵黄液体全部进行过滤，收集滤液；