[发明专利]一种抗真菌人工合成多肽喷雾组合及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物合成领域，具体说是一种抗菌喷雾组合的制备技术，更具体地说是涉及一种抗真菌人工合成多肽喷雾组合及其制备方法。

背景技术

真菌感染，轻者仅累及皮肤黏膜，重者可致某个器官侵袭性感染,如口腔炎、阴道炎、血液感染和深部组织感染。我国台湾地区的调查报告显示，仅深部念珠菌感染30 天内死亡率为 36.7%。Hoffmann调查研究了巴西130名深部真菌感染患者，侵袭性真菌类感染病的病死率可高达 49.2%，病人的平均住院时间为 53.5 天，给患者带来极大的痛苦和经济负担。浅部皮肤真菌类病的治疗一般以外用药为主,如特比萘芬、克霉唑、萘替芬、布替萘芬、联苯苄唑、咪康唑、酮康唑、制霉菌素、舍他霉素等霜剂和软膏和两性霉素 B 泡腾片等。 深部真菌类感染较难治愈，目前用于治疗深部真菌类感染的药物有两性霉素B、伊曲康唑、氟康唑、制霉菌素、卡泊芬净等。然而随着深部真菌类感染的治疗，出现耐药性甚至多重耐药性。世界卫生组织认为耐药菌是威胁人类健康的“三大元首”之一，因此探索新型抗生素迫在眉睫，因此开发一种新型的抗真菌药物具有重要意义。

抗菌肽是一类具有抗菌活性肽的简称，一般含有10 到50个氨基酸残基不等，一般带有2 到7个正电荷，有两亲结构，具有抗细菌、真菌、病毒和抗肿瘤活性。抗菌肽是生物防御系统中产生的活性物质，是组成生物先天免疫的重要部分。1972年，瑞典科学家首次分离得到抗菌肽天蚕素(Cecropin)。40多年以来，人们从细菌、真菌、昆虫、两栖类动物、哺乳动物等不同的生物体内发现大量不同种类的抗菌肽。截至到2017年12月，抗菌肽数据库(APD，http://aps.unmc.edu/AP/main.php）已收录多达2927种抗菌肽。

与传统抗生素相比，该人工合成抗真菌多肽Ala-Arg-Ile-Leu-Ser-Ile-Leu-Arg-His-Gln-Gln具有很多优势，该抗菌肽分子量小，仅由11个氨基酸组成；抗菌谱广，对念珠菌类真菌具有广谱抗菌活性，对细菌和癌细胞都有抑制活性；抑菌作用强，特别是对临床上极为难治的白色念珠菌具有较高的抑菌活性， MIC₉₀=9.5μg/mL，与Antimicrobial Peptide Database (APD）中已收录的1047种抗真菌多肽相比，其抑菌活性同比占80%以上，无耐药性产生等，有望取代传统抗生素。

目前被广泛接受的观点是抗菌肽通过下述几种不同的作用机制来发挥抗菌作用。破坏细胞膜：破坏细胞膜的完整性，导致细胞内溶物大量外渗，最终导致微生物死亡，从而发挥抗菌活性。对细胞核染色体的影响：部分抗菌肽可与微生物核酸结合，抑制DNA复制，影响细胞核染色体的正常功能。抑制细胞壁的合成。

该人工合成抗真菌多肽有着新颖的作用机制，该人工合成抗真菌多肽是一种非破膜的小肽，虽然其影响细胞膜的稳定性，但对细胞膜结构完整性没有影响。该人工合成抗真菌多肽通过非跨膜转用机制进入真菌细胞内，直接作用于细胞内部结构引起一系列信号通路转导。例如：该人工合成抗真菌多肽引起线粒体膜电位降低，从而使线粒体膜通透性增加，致使线粒体膜内溶物从线粒体内渗出到胞质中，电子传递受损。其次，该人工合成抗真菌多肽打破了细胞内Ga²⁺离子平衡，甚至可引真菌发生凋亡现象。

该抗菌肽因为作用机理特殊，微生物对其不易产生耐药性，抗真菌具有广谱性，合成价格低廉。为此，我们提出一种抗真菌人工合成多肽喷雾组合及其制备方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗真菌人工合成多肽喷雾组合及其制备方法。具体方案为：一种抗真菌人工合成多肽喷雾组合，包括抗真菌人工合成多肽液和喷雾基液；其特征在于抗真菌人工合成多肽液成分按重量比为：抗真菌多肽合成液0.2～0.4份、山梨糖醇20～40份、单聚合度完全脱乙酰壳寡糖50～80份、去离子水400份；所述喷雾基液成分按质量比：黄秋葵多糖提取物1～3份、甘油5～10份、抗性糊精1～10份、维生素E 2～10份、乳酸0.1～1份、水杨酸0.1～1份、L-半胱氨酸1～3份、N-乙酰半胱氨酸1～3份、赖氨酸0.5～1份、库拉索芦荟0.5～1份、谷胱甘肽0.5～1份、去离子水450～480份；真菌人工合成多肽液和喷雾基液的配比为质量比500：500。

一种抗真菌人工合成多肽喷雾组合，其特征在于：所述的抗真菌人工合成多肽的序列为Ala-Arg-Ile-Leu-Ser-Ile-Leu-Arg-His-Gln-Gln。