[发明专利]酶法定量测定乳中乳过氧化物酶活性的方法及其试剂盒有效
申请号: | 201711289021.X | 申请日: | 2017-12-07 |
公开(公告)号: | CN108181245B | 公开(公告)日: | 2020-12-08 |
发明(设计)人: | 郑楠;文芳;李松励;张养东;李慧颖;王加启 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12N9/96 | 分类号: | C12N9/96;G01N21/31;G01N1/38 |
代理公司: | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535 | 代理人: | 刘元霞;牛艳玲 |
地址: | 100193 北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 法定 测定 乳中 过氧化物 活性 方法 及其 试剂盒 | ||
1.一种用于酶法定量检测乳中乳过氧化物酶活性的试剂盒,包含样品处理液、乳过氧化物酶标准品溶液,和样品稀释液;所述样品处理液含有水和10-20w/w%的乙酸;所述样品稀释液含有水和1-5w/w%的BSA;所述乳过氧化物酶标准品溶液由乳过氧化物酶,海藻糖,可溶性钙盐和水组成,各组分的含量比例为:乳过氧化物酶:海藻糖:可溶性钙盐以钙计=1U:(0.125g~0.25g):(0.00025g~0.002g)。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述乳过氧化物酶标准品溶液中各组分的含量比例为:乳过氧化物酶:海藻糖:可溶性钙盐以钙计=1U:(0.15g~0.25g):(0.001g~0.0015g)。
3.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述乳过氧化物酶标准品溶液为一个乳过氧化物酶标准品溶液,其中乳过氧化物酶的含量为320~800U/L。
4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述乳过氧化物酶标准品溶液为一个乳过氧化物酶标准品溶液,其中乳过氧化物酶的含量为400U/L。
5.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,试剂盒中所述乳过氧化物酶标准品溶液为含有400U/L乳过氧化物酶、5-10w/w%海藻糖,0.01-0.08w/w%以钙计的可溶性钙盐的乳过氧化物酶标准品溶液。
6.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,试剂盒中所述乳过氧化物酶标准品溶液中海藻糖的含量为6-10w/w%,可溶性钙盐以钙计的含量为0.04-0.06w/w%。
7.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述乳过氧化物酶标准品溶液为至少5个乳过氧化物酶标准品溶液,所述至少5个乳过氧化物酶标准品溶液中的乳过氧化物酶浓度呈倍数递增,所述呈倍数递增的浓度以10-25U/L为起点,以至少2倍的倍数递增。
8.如权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述呈倍数递增的浓度以25U/L为起点,以2倍的倍数递增。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,试剂盒中所述乳过氧化物酶标准品溶液为25U/L、50U/L、100U/L、200U/L、400U/L五个浓度梯度的标准品溶液。
10.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述样品处理液中乙酸含量为10-15w/w%。
11.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述样品稀释液中BSA含量为1-3w/w%。
12.如权利要求1或2所述的试剂盒,进一步包含底物溶液,所述底物溶液含有0.1mol/L柠檬酸、0.2mol/L磷酸氢二钠、0.3mmol/L H2O2和0.3mmol/L TMB。
13.如权利要求1或2所述的试剂盒,进一步包含终止液,所述终止液为0.18mol/L的硫酸溶液。
14.如权利要求1或2所述的试剂盒,其包含:1瓶1ml装的乳过氧化物酶标准品溶液,1瓶60ml装的乙酸含量为10-15w/w%的样品处理液,1瓶12ml装的BSA含量为1-3w/w%的样品稀释液,1瓶6ml装的底物溶液,1瓶12ml装的终止液,所述乳过氧化物酶标准品溶液含有400U/L的乳过氧化物酶,6-10w/w%的海藻糖,0.04-0.06w/w%以钙计的可溶性钙盐;所述底物溶液含有0.1mol/L柠檬酸、0.2mol/L磷酸氢二钠、0.3mmol/L H2O2和0.3mmol/L TMB;所述终止液为0.18mol/L的硫酸溶液。
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