[发明专利]一种检测活细胞内Paxillin蛋白力传递的荧光生物探针有效
申请号: | 201711274845.X | 申请日: | 2017-12-06 |
公开(公告)号: | CN108120836B | 公开(公告)日: | 2020-08-14 |
发明(设计)人: | 刘波;邓莎 | 申请(专利权)人: | 大连理工大学 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;G01N33/68 |
代理公司: | 大连理工大学专利中心 21200 | 代理人: | 梅洪玉 |
地址: | 116024 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 细胞内 paxillin 蛋白 传递 荧光 生物 探针 | ||
1.一种检测活细胞内Paxillin蛋白力传递的荧光生物探针,其特征在于,该探针包括FRET荧光蛋白对ECFP(1-2)与YPet(1-4)、弹性序列Linker(1-3)、Paxillin蛋白的结构域Ld12序列(1-1)以及Paxillin蛋白的另一个结构域Lim1234序列(1-5)五个部分,运用亚克隆技术对这五个部分的DNA序列进行剪切和拼接重构,获得编码如SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列的DNA序列,并与pcDNA3.1(+)形成重组质粒。
2.如权利要求1所述的一种检测活细胞内Paxillin蛋白力传递的荧光生物探针的应用,其特征在于,将该探针转染入活细胞,自行表达出荧光蛋白重构融合探针结构,并自动整合到Paxillin蛋白所在的局部黏着斑上,使用FRET荧光显微镜动态检测分析活细胞内能量转移的动态效率变化,从而检测活细胞内Paxillin蛋白力传递的变化。
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