[发明专利]一种基于抑制COX-2活性的中药组合物检测方法在审
申请号: | 201711268953.6 | 申请日: | 2017-12-05 |
公开(公告)号: | CN109870432A | 公开(公告)日: | 2019-06-11 |
发明(设计)人: | 王伽伯;肖小河;贾振华;张海珠;余方荣;葛新建;牛明;马永刚;王宏涛;田书彦 | 申请(专利权)人: | 石家庄以岭药业股份有限公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;A61K36/78;A61P29/00;A61K33/06;A61K31/045 |
代理公司: | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535 | 代理人: | 刘元霞 |
地址: | 050035 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 中药组合物 抑制率 对照品溶液 样品溶液 酶活力 检测 抗炎活性 可信限率 效价 制备 | ||
1.一种中药组合物的检测方法,其特征在于,所述方法包括:将中药组合物制备为可检测的样品,与环氧化酶(COX)接触,测定样品对环氧化酶(COX)的抑制率;
其中,所述中药组合物由如下原料药制成:
连翘200-300重量份、金银花200-300重量份、炙麻黄50-100重量份、炒苦杏仁50-100重量份、石膏200-300重量份、板蓝根200-300重量份、绵马贯众200-300重量份、鱼腥草200-300重量份、广藿香50-100重量份、大黄30-80重量份、红景天50-100重量份、薄荷脑5-10重量份、甘草50-100重量份。
2.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述检测方法包括如下步骤:
A)制备中药组合物样品溶液和/或对照品溶液;
B)测定样品溶液和对照品溶液对COX-2酶活力的抑制率。
3.如权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述COX-2酶活力的抑制率的测定方法包括如下步骤:
a)向待测溶液中加入COX-2酶,培养一定时间;
b)向待测溶液中加入ADHP和花生四烯酸;
c)显色,检测荧光强度;
d)按如下公式计算抑制率,
抑制率%=(初始活性样品的荧光强度-待测样品的荧光强度)/初始活性样品的荧光强度×100%。
4.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于,步骤a中COX-2酶用量为500U/mL~1000U/mL。
5.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于,步骤b中AA经过纯化。
6.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于,步骤c中荧光强度在激发光波长530-540nm,发射波长585-595nm下检测。
7.如权利要求2所述的检测方法,其特征在于,步骤A中所述对照品选自常规抗炎药物或可用于作为对照品的本发明中药组合物。
8.如权利要求7所述的检测方法,其特征在于,所述对照品为塞来昔布或罗非昔布。
9.如权利要求8所述的检测方法,其特征在于,所述对照品溶液浓度为1×105U/mL~2×105U/mL;优选的,所述对照品溶液浓度为1.2×105U/mL。
10.如权利要求2所述的检测方法,其特征在于该方法包括步骤C:以COX-2酶活力抑制率为指标,计算效价和可信限率;中药组合物抑制COX-2酶活力的效价不得低于500U·μg-1,平均可信限率小于25%。
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