[发明专利]一种微流控芯片、手动离心装置及核酸检测方法

权利要求书

1.一种微流控芯片，其特征在于，包括至少一加样层和设置在所述加样层下侧的通道层；其中，

在所述通道层的上表面设置若干沿中心分布、以装载待测试剂并将待测试剂传输至其中一腔室的测试单元，每个所述测试单元包括至少两个相互之间通过通道连接的腔室；

所述加样层沿中心周向设置若干与所述通道层对应的加样孔，以向对应的所述测试单元的其中一腔室内注入试剂。

2.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述加样层包括设置在上侧，以向所述测试单元中靠近中心的腔室加载试剂的上加样层，其上设置上层加样孔；

还包括设置在所述上加样层下侧，以向所述测试单元中远离中心腔室加载试剂的中加样层，其上设置中层加样孔。

3.根据权利要求2所述的微流控芯片，其特征在于，在所述的中加样层沿中心周向设置若干与所述通道层的测试单元的其中一腔室、上加样层的上层加样孔均对应的第一输液孔。

4.根据权利要求3所述的微流控芯片，其特征在于，每个所述测试单元设置四个腔室，沿所述通道层的中心向边缘方向依次为第一腔室、第二腔室、第三腔室和第四腔室，第一、二、三腔室分别加载不同的试剂，在旋转离心力的作用下将试剂通入第四腔室中混合。

5.根据权利要求4所述的微流控芯片，其特征在于，所述第一腔室中装载对芯片内的样品前处理的药品；

所述第二腔室中预装入核酸扩增用引物，用于对目标核酸序列的特异性识别；

所述第三腔室中预装入核酸扩增用试剂的混合物，用于对目标核酸序列的特异性扩增与检测。

6.根据权利要求2所述的微流控芯片，其特征在于，在所述上加样层与中加样层之间设置双面胶，将两层粘贴，其上设置供试剂通过的第二输液孔，将从上加样层注入的试剂导入下侧的测试单元中。

7.根据权利要求2所述的微流控芯片，其特征在于，所述上层加样孔、中层加样孔均为沉头孔，在沉头孔的孔肩上设置加样孔密封材料，沉头孔用以防止密封材料与芯片间的空隙产生毛细作用使腔室中的溶液流出。

8.根据权利要求2所述的微流控芯片，其特征在于，在所述相邻腔室之间设置通道，在通道上设置扩展结构，用以防止由于毛细作用使添加的溶液提前混合；所述扩展结构为开设在通道上的凹槽，凹槽的宽度大于通道的宽度，深度大于通道深度。

9.一种具有上述权利要求1-8任一项所述的微流控芯片的手动离心装置，其特征在于，包括固定所述微流控芯片的转盘以及离心装置本体、设置在离心装置本体上的手动装置；其中，

所述手动装置包括：具有齿的拉杆，与拉杆内核的输入齿轮，以及与所述输入齿轮啮合的输出齿轮，所述输出齿轮带动转轴旋转，转轴带动安装在转盘上的微流控芯片旋转。

10.一种具有上述权利要求1-8任一项所述的微流控芯片的核酸检测方法，其特征在于，包括：

步骤S1,装液过程,在待测样品中加入碱与十二烷基硫酸钠组成的裂解液，以及防止裂解液对后续核酸扩增的抑制的沸石，第二腔室中可预装入核酸扩增用引物，用于对目标核酸序列的特异性识别，第三腔室中可预装入核酸扩增用试剂的混合物，用于对目标核酸序列的特异性扩增与检测；

步骤S2,离心过程，将微流控芯片固定到手动离心装置中，转动手动抽动离心装置的拉杆，使转盘带动芯片旋转，在旋转中，第一腔室、第二腔室、第三腔室中的液体将混合并最终汇集到第四腔室中；之后，使用矿物油填充各腔室的空余空间，并使用胶带粘贴封闭各加样孔；

步骤S3,反应过程，将便携式暖贴放入手动离心装置的下层空腔和芯片上层空间，盖好装置顶盖，装置中温度将逐渐升高，并在63-68℃的范围内维持至少2h，在过程中实现核酸扩增反应；

步骤S4,判断过程，上述反应过程完成后打开装置，观察芯片第四腔室中反应液的颜色或荧光，从而判断扩增反应是否发生，以及相对应的样品中目标序列是否存在。