[发明专利]治疗糖尿病创面注射剂的制备方法及其产品

权利要求书

1.一种治疗糖尿病创面注射剂的制备方法，包括以下步骤：

1）将脐带间充质干细胞在培养皿中培养，用胰蛋白酶进行消化，消化完后添加血清去除胰蛋白酶的活性，接着进行第一次离心，离心完毕后倒掉上清液，然后用PBS溶液重悬细胞，进行第二次离心，离心完毕后倒掉上清液，再添加PBS溶液重悬细胞，得到含有间充质干细胞的溶液；

2）取І型胶原蛋白溶解于醋酸水溶液，得到І型胶原蛋白溶液；取层粘连蛋白溶解于PBS溶液溶解，得到层粘连蛋白溶液；将І型胶原蛋白溶液和层粘连蛋白溶液进行混合，得到混合溶液；

3）在步骤2）的混合溶液中加入步骤1）制备的含有间充质干细胞的溶液，并用微量移液器轻轻反复吹打，至间充质干细胞充分分散均匀，即得治疗糖尿病创面的注射剂。

2.根据权利要求1所述的治疗糖尿病创面注射剂的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中，细胞培养至6-8代。

3.根据权利要求1或2所述的治疗糖尿病创面注射剂的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中，消化时间为1-3min，胰蛋白酶的质量分数为0.1%-0.5%。

4.根据权利要求1或2所述的治疗糖尿病创面注射剂的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中，含有间充质干细胞的溶液浓度为5×10⁶-2×10⁷个/ml。

5.根据权利要求1所述的一种治疗糖尿病创面的注射剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中，醋酸水溶液的质量体积比为0.1-1.0%。

6.根据权利要求1或5所述的治疗糖尿病创面注射剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中，І型胶原蛋白溶液的浓度为50-200ug/ml；层粘连蛋白溶液的浓度为25-100ug/ml。

7.根据权利要求6所述的治疗糖尿病创面注射剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中，І型胶原蛋白溶液与层粘连蛋白溶液的体积比为1:(1-2)。

8.根据权利要求1所述的治疗糖尿病创面注射剂的制备方法，其特征在于，所述步骤3）中，混合溶液与间充质干细胞的溶液的体积比为1:(1-4）。

9.根据权利要求1所述的治疗糖尿病创面注射剂的制备方法制备得到糖尿病创面注射剂。