[发明专利]一种藻毒素及其提取纯化方法

权利要求书

1.一种藻毒素的提取纯化方法，其包括以下步骤：

步骤一：采用质量浓度为60wt％的甲醇溶液溶解蓝藻干粉，超声振荡后形成藻浆，然后离心沉降，分离出上层清液和残渣；

步骤二：向所述残渣中加入质量浓度为60wt％的甲醇溶液溶解，然后磁力搅拌并超声振荡形成藻浆，随后离心沉降，再次分离出上层清液和残渣，将本步骤获得的上层清液与步骤一获得的上层清液混合，形成粗提液；

步骤三：重复所述步骤二2次以上，然后调节所述粗提液的pH值去除蛋白质，再经过滤、除甲醇后得到提取液；

步骤四：将所述提取液经滤膜初步过滤后采用固相萃取柱进行富集浓缩和洗脱，保护气吹干后得到藻毒素。

2.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在在于：所述蓝藻干粉包括水华蓝藻制得的干粉。

3.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在在于：所述步骤三中，采用砂芯漏斗进行过滤。

4.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在在于：所述步骤三中，所述除甲醇的步骤为：在40℃下，采用真空旋转蒸发去除甲醇，得到所述提取液。

5.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在在于：所述步骤四中，所述滤膜的孔径为0.45μm以下。

6.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在在于：所述步骤四中，在进行富集浓缩和洗脱前，依次采用纯甲醇和超纯水将所述固相萃取柱进行活化。

7.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在在于：所述步骤四中，所述富集浓缩的流速为4mL·min^-1；

优选地，所述步骤四中，所述富集浓缩和洗脱的步骤为：将经滤膜过滤后的提取液注入固相萃取柱中进行富集浓缩；然后采用质量浓度为20wt％的甲醇溶液和质量浓度为30wt％的甲醇溶液依次淋洗固定相；采用保护气吹干所述固相萃取柱，然后采用质量浓度为40wt％的甲醇溶液淋洗小柱，最后采用质量浓度为70wt％的甲醇溶液洗脱，再用保护气吹干浓缩至所需浓度，得到藻毒素。

8.根据权利要求7所述的提取纯化方法，其特征在于：所述质量浓度为70wt％的甲醇溶液中添加有质量浓度为0.02wt％三氟乙酸。

9.一种藻毒素，其是通过权利要求1-8任一项所述的藻毒素的提取纯化方法提纯得到的微囊藻毒素。

10.根据权利要求9所述的藻毒素，其特征在于：所述藻毒素的HPLC-UV/DAD检测纯度≥90％。