[发明专利]一种维生素C二步发酵生产方法

权利要求书

1.一种维生素C二步发酵生产方法，包括对由巨大芽孢杆菌和生酮基古龙酸菌组成的混合菌系的三级种子扩大培养，其特征是，将培养好的三级种子液直接接入到灭菌处理过的发酵培养基中进行发酵培养，同时在发酵一开始就流加L～山梨糖，

其中所述发酵培养基组成为：尿素0.1～0.3%、生物素0.01～0.04%、玉米浆1.5～2.5%、磷酸二氢钾0.1～0.3%、硫酸镁0.01～0.04%。

2.按照权利要求1所述的维生素C二步发酵生产方法，其特征在于所述发酵培养条件为：接种量15～30%，培养温度28～30℃；通气量1：0.5～1.2v/v/min，搅拌、补料；发酵过程溶氧保证在20%以上，培养周期40～45hr放罐。

3.按照权利要求1所述的维生素C二步发酵生产方法，其特征在于所述L-山梨糖的流加量以控制发酵液中残糖15～35mg/ml为基准，放罐前4～8h结束流加L-山梨糖，放罐残糖低于0.6mg/ml。

4.按照权利要求1所述的维生素C二步发酵生产方法，其特征在于，在发酵过程中还需要补碱液，所述碱液为质量浓度为25%无菌碳酸钠溶液，控制发酵液中pH7.0～7.5。

5.按照权利要求1所述的维生素C二步发酵生产方法，其特征在于所述三级种子扩大培养中

一级种子培养基组成：L-山梨糖1.2～1.5%、葡萄糖0.2 ～0.5%、硫酸镁0.08～0.12%、尿素0.1～0.2%、玉米浆1.0～1.2%、碳酸钙0.05～0.1%；pH 7.0～7.4；

一级种子培养过程控制：培养温度：28～30℃，通气量1：1.0～1.5v/v/min并搅拌，培养周期：24±4h；

二级种子培养基组成：L-山梨糖1.2～1.5%、葡萄糖0.2 ～0.5%、硫酸镁0.08～0.12%、尿素0.1～0.2%、玉米浆1.0～1.2%、碳酸钙0.05～0.1%；pH 7.0～7.4；

二级种子培养过程控制：接种量：3～5%；培养温度：28～30℃；通气量1：1.0～1.5v/v/min并搅拌，培养周期：20～28hr；

三级种子培养基组成：L-山梨糖1.2～1.5%、葡萄糖0.2 ～0.5%、硫酸镁0.01～0.04%、尿素0.1～0.2%、玉米浆1.0～1.5%、碳酸钙0.08～0.20%；pH 7.0～7.4；

三级种子培养过程控制：接种量：8～10%；培养温度：28～30℃；通气量1：1.0～1.5v/v/min并搅拌，培养周期：16～24h。