[发明专利]一种用于黄曲霉毒素B1的可视化检测方法在审
申请号: | 201711201808.6 | 申请日: | 2017-11-27 |
公开(公告)号: | CN107991293A | 公开(公告)日: | 2018-05-04 |
发明(设计)人: | 谭贵良;刘子雄;王乾蕾;李向丽;郑鸿涛;陈坚 | 申请(专利权)人: | 中山市食品药品检验所 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N33/53;G01N33/543 |
代理公司: | 中山市科创专利代理有限公司44211 | 代理人: | 凌信景,胡犇 |
地址: | 528437 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 黄曲霉 毒素 b1 可视化 检测 方法 | ||
1.一种用于黄曲霉毒素B1的可视化检测方法,其特征在于:
A、将巯基化黄曲霉毒素B1适配体DNA1和巯基化适配体的互补链DNA2分别与13±2nm纳米金连接形成适配体-纳米金探针和互补链-纳米金探针;
B、通过竞争法进行黄曲霉毒素B1的可视化检测,将适配体-纳米金探针、互补链-纳米金探针和待测物进行混合:
当待测物中含有靶标时,靶标与适配体结合,使适配体-纳米金探针和互补链-纳米金探针呈游离状态,在高盐浓度下,纳米金容易发生聚集,颜色由红色变成蓝色;
当待测物中不含靶标时,适配体与其互补链碱基互补配对结合,使适配体-纳米金探针和互补链-纳米金探针呈稳定的网络结构,在高盐浓度下,纳米金不发生聚集,颜色仍为红色;
C、随着B步骤中靶标浓度的增大,纳米金颜色由红色逐渐变为蓝色,通过测定溶液在200~800nm的紫外-可见光谱,即可实现对待测物中黄曲霉毒素B1的定量检测。
2.根据权利要求1所述一种用于黄曲霉毒素B1的可视化检测方法,其特征在于:黄曲霉毒素B1适配体的互补链DNA2的序列为:
5'SH-TTCACGGTAGCACGCATAGGTGGGGGCAGCTAAAGTCTCC-3'。
3.根据权利要求1所述一种用于黄曲霉毒素B1的可视化检测方法,其特征在于:步骤A中制备适配体-纳米金探针时,NaCl溶液陈化浓度为200mmol/L,制备互补链-纳米金时,NaCl溶液陈化浓度为100mmol/L。
4.根据权利要求1所述一种用于黄曲霉毒素B1的可视化检测方法,其特征在于:步骤A中巯基化黄曲霉毒素B1适配体与纳米金偶联形成识别捕获探针,巯基化黄曲霉毒素B1适配体的互补链与纳米金偶联形成信号探针,适配体-纳米金探针与互补链-纳米金探针的体积比为1:1。
5.根据权利要求1所述一种用于黄曲霉毒素B1的可视化检测方法,其特征在于:B步骤中,适配体-纳米金探针、互补链-纳米金探针和待测物混合后加入NaCl溶液,该NaCl溶液浓度为400mmol/L。
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