[发明专利]一种旱地木槿种子无菌萌发与快速繁殖方法

权利要求书

1.一种旱地木槿种子无菌萌发与快速繁殖的方法，其特征在于该方法包括外植体选择与消毒、种子无菌萌发培养、增殖与继代培养、壮苗与生根培养、瓶苗移栽步骤；

所述外植体选择与消毒是取旱地木槿略泛黄的饱满果实，用1％肥皂水浸泡10分钟，经流水冲洗干净后进行组培常规外植体消毒；

所述种子无菌萌发培养是：在种子无菌萌发培养基中暗培养7天后进行光照，光照强度为1000LUX，温度为23～30℃，种子无菌萌发培养基为改良的MS培养基，将NH₄NO₃由1650mg/L减少为400mg/L，KNO₃由1900mg/L减少为450mg/L，不加其他有机物，其余元素不变，20天后，种子开始萌发；

所述的增殖与继代培养是在增殖与继代培养基中培养，增殖与继代培养基为MS培养基+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L IAA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH5.8，培养周期为30天；

所述的壮苗与生根培养是在壮苗与生根培养基中培养，壮苗与生根培养基为MS培养基+0.3mg/L NAA+0.3mg/L IAA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，pH5.8，培养周期20天；

所述的瓶苗移栽是：将生根瓶苗提前一周置放于大棚炼苗，准备基质，基质为体积比的珍珠岩∶腐殖土∶生红土＝1∶2∶3，用800倍多菌灵进行喷施拌土，用塑料膜密封消毒7天，调节pH至5.8，开瓶取苗，洗净基部培养基，移栽，及时喷水并覆盖塑料膜保湿，大棚温度为20～30℃，空气湿度50～60％，基质湿度75～85％。

2.根据权利要求1所述的旱地木槿种子无菌萌发与快速繁殖方法，其特征在于所述外植体选择与消毒是取旱地木槿略泛黄的饱满果实为外植体，用1％肥皂水浸泡10min，经流水冲洗干净后，拿到超净台上，用75％的酒精消毒15min，无菌水冲洗3遍后，去掉果皮，取出种子，用0.1％升汞溶液进行表面消毒5min，无菌水清洗3～5次，接种于准备好的旱地木槿种子萌发培养基中，每瓶5粒。

3.根据权利要求1所述的旱地木槿种子无菌萌发与快速繁殖方法，其特征在于所述种子无菌萌发为全黑暗培养7天后进行人工辅助光诱导，光强度为1000LUX，温度为23～30℃；增殖与继代、壮苗与生根培养的光照条件为人工辅光1500LUX，温度为23～30℃。

4.根据权利要求1所述旱地木槿种子无菌萌发与快速繁殖的方法，其特征在于生根瓶苗移栽前置于大棚炼苗适应一周后移栽在准备好的基质中。

5.根据权利要求1所述旱地木槿种子无菌萌发与快速繁殖的方法，其特征在于移栽基质为：体积比的珍珠岩∶腐殖土∶生红土＝1∶2∶3，用800倍多菌灵进行喷施拌土，用塑料膜密封消毒7天，调节pH至5.8，开瓶取苗，洗净基部培养基，移栽，及时喷水并覆盖塑料膜，大棚温度为20～30℃，遮光率75～85％，空气湿度50～60％，基质湿度75～85％，30天后成活率95％以上。