[发明专利]一种BOD生物传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种BOD生物传感器的制备方法，其特征在于，采用筛选后的菌种制备BOD生物传感器，包括以下步骤：

(1)将醋酸纤维素与沸水充分混匀，配制成夹膜后，冷却；

(2)将筛选后的菌种、淀粉和聚乙烯醇进行混合，混匀后涂抹在所述夹膜上，形成薄膜；

(3)对所述薄膜进行抽吸，使菌种紧密贴在薄膜内壁上；

(4)在薄膜上涂抹粘连剂，制成BOD生物传感器。

2.如权利要求1所述的BOD生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中筛选后的菌种、淀粉和聚乙烯醇的质量比为1:(0.5-1.5):(1.5-2.5)，优选为1:(0.8-1.2):(1.8-2.4)，进一步优选为1:1:2。

3.如权利要求1或2所述的BOD生物传感器的制备方法，其特征在于，将制备得到的生物传感器进行保藏；

优选地，所述保藏的pH为7.0-7.8，优选为7.2-7.6，更优选为7.4-7.5；

优选地，所述保藏的甘油的质量浓度为7-23％，优选为9-20％；

优选地，所述保藏的温度为-15～-25℃，优选为-18～-20℃。

4.如权利要求1-3之一所述的BOD生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述醋酸纤维素与沸水的质量比为1:(95-105)，优选为1:(98-100)。

5.如权利要求1-4之一所述的BOD生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)菌种筛选：利用污染物梯度浓度平板涂布法结合平板四区划线进行菌种的分离纯化，获得纯菌种后置于牛肉膏蛋白胨培养基中震荡培养约24h后，震荡离心、生理盐水洗脱，制成湿菌体，即筛选后的菌种；

(2)制备BOD生物传感器：将醋酸纤维素与沸水按照质量比1:(95-105)充分混匀，配制成夹膜后，室温下冷却；将筛选后的菌种、淀粉和聚乙烯醇按照1:(0.5-1.5):(1.5-2.5)的质量比混合均匀后涂抹在所述夹膜上，形成薄膜，对所述薄膜进行抽吸，使菌种紧密贴在薄膜内壁上，再在薄膜上涂抹粘连剂，制成BOD生物传感器；

(3)BOD生物传感器的保藏：将制成的BOD生物传感器在pH7.0-7.8、甘油质量浓度为7-23％且温度为-15～-25℃的条件下进行保藏。

6.一种如权利要求1-5之一所述的方法制备得到的BOD生物传感器。

7.如权利要求6所述的BOD生物传感器在水体BOD检测方面的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

根据BOD生物传感器氧电极输出的溶解氧降低值与待测水体BOD浓度的线性关系，得出待测水体的BOD浓度。

9.如权利要求7或8所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

(1)分别配置不同BOD5浓度的水体；

(2)用所述BOD生物传感器分别测定所述不同BOD5浓度下水体的溶解氧降低值；

(3)制作水体BOD5浓度与溶解氧降低值的标准曲线；

(4)当待测水体的溶解氧值稳定后加入所述BOD生物传感器，待待测水体的溶解氧下降到另一稳定值后，求得两侧溶解氧值之差，通过步骤(3)所述标准曲线得出待测水体的BOD值。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，步骤(1)所述水体BOD5浓度的范围为15-100mg/L，且水体BOD5浓度相差5-10mg/L；

优选地，步骤(2)所述测定溶解氧降低值的具体温度为30-35℃；

优选地，步骤(2)所述测定溶解氧降低值的具体曝气强度为20-25h/L。