[发明专利]一种三七多糖的制备方法在审
申请号: | 201711184091.9 | 申请日: | 2017-11-23 |
公开(公告)号: | CN109824790A | 公开(公告)日: | 2019-05-31 |
发明(设计)人: | 王阳光 | 申请(专利权)人: | 威海紫光生物科技开发有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 264205 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 常规提取 多糖提取 色谱分离 提取物 色素 抽干 醇提 水煮 浸泡 | ||
1.一种三七多糖的制备方法,其特征在于三七多糖的提取按以下步骤进行:将粉碎后的三七用无水乙醇浸泡抽去油脂和色素,药渣风干后水煮60 rain,离心,沉淀中加入蒸馏水再煮60 min,重复2~3次,弃沉淀,合并上清液(棕黄色),减压浓缩,上清液加入3倍体积95% 乙醇,静置24 h,离心收集沉淀;沉淀经无水乙醇、丙酮分别洗涤2次,用抽滤漏斗抽干,P2O5干燥,中性蛋白酶结合Sevag法脱蛋白得粗多糖。
2.一种三七多糖的制备方法,其特征在于三七多糖的纯化按以下步骤进行:粗多糖溶解在PBS中,离心除去不溶物,上清液过DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子色谱柱进行色谱分离,用0~ 0.8 mol/L NaCL-PBS溶液梯度洗脱(pH7.6),以苯酚-硫酸法测490 nm 处吸光度值(A490),做洗脱曲线,合并主峰部分,冻干,获得三七多糖PNPS I、PNPSⅡ组分;分别称取等量PNPS I、PNPSⅡ组分,溶于蒸馏水,过CM-Sepharose Fast Flow阴离子色谱柱,用pH5.0的缓冲液(2.5 mmol/L NaAc-HAc)梯度洗脱,盐梯度为O~0.5 mol/L NaCL,收集组分,以苯酚一硫酸法 测定A490,作洗脱曲线,合并主峰,冻干得三七多糖。
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