[发明专利]一种电化学生物传感器及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种电化学生物传感器，包括乙酰胆碱酯酶修饰电极，所述乙酰胆碱酯酶修饰电极包括由二氧化钛纳米管和沉积在二氧化钛纳米管表面上的纳米金构成的复合电极、以及通过附着在所述电极表面的壳聚糖-戊二醛混合膜固定在所述复合电极的乙酰胆碱酯酶。

2.根据权利要求1的所述电化学生物传感器，其中所述乙酰胆碱酯酶修饰电极通过以下步骤制备：

S310，将所述复合电极浸泡在壳聚糖溶液中，然后干燥，得到表面附有壳聚糖膜的复合电极；

S320，将步骤S310的表面附有壳聚糖膜的复合电极浸泡在戊二醛溶液中，然后干燥，得到表面附有壳聚糖-戊二醛混合膜的复合电极；

S330，在步骤S320的表面附有壳聚糖-戊二醛混合膜的复合电极上滴加乙酰胆碱酯酶溶液，然后干燥，得到所述乙酰胆碱酯酶修饰电极。

3.根据权利要求1或2的所述电化学生物传感器，其中所述复合电极通过以下步骤制备：

S210，以钛片为阳极、铝片为阴极、0.2～1.0wt％氟化铵-丙三醇溶液为电解质，在15～30V，优选20V，电压下进行阳极氧化1～3h，优选2h，然后用超纯水清洗干净，500℃高温退火1h，得到二氧化钛纳米管；

S220，以步骤S210的二氧化钛纳米管为工作电极、Ag/AgCl电极为参比电极，Pt电极对电极，电解液为0.05～0.2mM的AuClH₄·4H₂O，在恒电位下在二氧化钛纳米管表面沉积纳米金,得到所述复合电极。

4.一种制备权利要求1-3中任一项的所述电化学生物传感器的方法，包括：

S310，将所述复合电极浸泡在壳聚糖溶液中，然后干燥，得到表面附有壳聚糖膜的复合电极；

S320，将步骤S310的表面附有壳聚糖膜的复合电极浸泡在戊二醛溶液中，然后干燥，得到表面附有壳聚糖-戊二醛混合膜的复合电极；

S330，在步骤S320的表面附有壳聚糖-戊二醛混合膜的复合电极上滴加乙酰胆碱酯酶溶液，然后干燥，得到所述乙酰胆碱酯酶修饰电极。

5.根据权利要求4的所述方法，包括：

S210，以钛片为阳极、铝片为阴极、0.2～1.0wt％氟化铵-丙三醇溶液为电解质，在15～30V，优选20V，电压下进行阳极氧化1～3h，优选2h，然后用超纯水清洗干净，500℃高温退火1h，得到二氧化钛纳米管；

S220，以步骤S210的二氧化钛纳米管为工作电极、Ag/AgCl电极为参比电极，Pt电极对电极，电解液为0.05～0.2mM的AuClH₄·4H₂O，在恒电位下在二氧化钛纳米管表面沉积纳米金,得到所述复合电极。

6.一种检测黄曲霉毒素B₁浓度的方法，包括将根据权利要求1-3中任一项的所述电化学生物传感器与黄曲霉毒素B₁接触。

7.根据权利要求6的所述检测黄曲霉毒素B₁浓度的方法，其中将含有黄曲霉毒素B₁的溶液滴加至所述电化学生物传感器的乙酰胆碱酯酶修饰电极的表面，然后放入含有氯化乙酰硫代胆碱的缓冲液中，在紫外光照射下，利用三电极体系测量通过乙酰胆碱酯酶修饰电极的电流值。

8.根据权利要求6或7的所述检测黄曲霉毒素B₁浓度的方法，其中所述三电极体系包括以乙酰胆碱酯酶修饰电极为工作电极、Ag/AgCl电极为参比电极，Pt电极对电极。

9.根据权利要求6-8中任一项的所述检测黄曲霉毒素B₁浓度的方法，其中采用时间-电流曲线法测量通过乙酰胆碱酯酶修饰电极的电流值。