[发明专利]诱导胚性愈伤组织的方法有效
| 申请号： | 201711176722.2 | 申请日： | 2017-11-22 |
| 公开（公告）号： | CN107853178B | 公开（公告）日： | 2020-07-28 |
| 发明（设计）人： | 张鲁斌;孙曼丽;宋康华;贾志伟 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京工信联合知识产权代理有限公司 11266 | 代理人： | 郭一斐 |
| 地址： | 524091 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 诱导 胚性愈伤 组织 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种诱导胚性愈伤组织的方法，其特征在于，包括以下步骤：
用灭菌试剂对菜心种子进行灭菌；
用灭菌后的菜心种子作为诱导愈伤的材料，接种于诱导愈伤组织的第一培养基上，并进行光照培养；
将光照培养后的愈伤组织转移至第二培养基上进行继代培养，获得胚性愈伤组织；
其中，所述灭菌步骤包括依次用70％v/v乙醇和1.5wt％次氯酸钠水溶液处理所述种子；
所述第一培养基和所述第二培养基独立地为在MS培养基中包括最终浓度分别为2.0mg/L的6-苄氨基嘌呤、1.0mg/L的萘乙酸、4.0mg/L的AgNO3、6～8g/L的琼脂粉和25～30g/L的蔗糖。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述光照培养进行12～16天。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述继代培养为每10天继代一次，连续继代至少3次。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述第一培养基和所述第二培养基的pH分别为5.7～5.8。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中，所述光照培养和所述继代培养的每日光照条件分别为14小时光照后，继续10小时黑暗，光照强度在1000～2000勒克斯之间，温度为20～25℃。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中，在灭菌步骤之后、光照培养步骤之前，用无菌去离子水清洗灭菌后的种子1至2次。
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