[发明专利]一种可有效降低依诺肝素钠中乙醇残留的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及可降低依诺肝素钠中乙醇残留的方法。

背景技术

肝素是由猪或牛的肠粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，临床上主要用于抗凝血和防治血栓栓塞性疾病。但由于肝素结构的多样性和分子量的多分散性，使其治疗窗窄，生物利用度低，半衰期短，还可能会造成出血和诱导血小板减少（HIT）、骨质疏松等副作用。

低分子肝素是将普通肝素通过不同降解工艺制得，常见的低分子肝素有达肝素钠、依诺肝素钠、那屈肝素钙等，其中依诺肝素钠常用来预防静脉血栓栓塞性疾病，治疗深静脉栓塞，治疗不稳定性心绞痛，用于血液体外循环中防止血栓形成等，与普通肝素相比依诺肝素钠具有更高的抗栓作用，生物利用度高，半衰期长，不易引起血小板减少，并能减少出血等不良反应，是一种安全有效的抗血栓药物。

依诺肝素钠是以肝素钠为起始物料，经制盐、酯化、降解、氧化等步骤制得，在依诺肝素钠的生产过程中需要用到乙醇进行沉淀来得到依诺肝素钠沉淀物，在最终的依诺肝素钠中往往会有乙醇的残留，降低依诺肝素钠中的残留乙醇是药典要求的重要指标之一，药典中要求乙醇残留≤5000ppm。

冷冻干燥是目前低分子肝素最常用的一种干燥方式，冷冻干燥在低温高真空度的环境下进行，不仅能保护产品的活性，而且产品冻干后疏松多孔，复溶性好，但单纯冷冻干燥虽会使乙醇残留符合药典规定，但是含量还很高。如CN106074400A公布了一种低分子肝素的冻干工艺，它是将那屈肝素钙溶解后，经过减压蒸馏，冷冻干燥后得到那屈肝素钙成品，部分实例中乙醇残留分别为0.47%、0.44%、0.46%，虽然达到药典标准5000ppm（0.5%），但是乙醇残留含量很高。依诺肝素钠作为低分子肝素的一种，冻干后同样也会出现乙醇残留偏高的情况。

发明内容

本发明提供一种可有效降低依诺肝素钠中乙醇残留的方法，以解决现有技术存在的问题。

为实现本发明目的，这种可有效降低依诺肝素钠中乙醇残留的方法其特征在于包括以下步骤：

a. 将1%～20% w/v的依诺肝素钠水溶液经0.22μm滤膜过滤后，在纳滤机内循环10～120分钟；

b. 将上述循环后的依诺肝素钠水溶液在进膜压力达到1.0～2.0Mpa时进行循环纳滤，在纳滤过程中，依据透过液的体积在依诺肝素钠水溶液中持续补加相同体积的纯化水；

c. 当透过液体积达到依诺肝素钠水溶液体积的1～20倍时停止补水，然后再继续纳滤至依诺肝素钠为5～30% w/v的浓缩液；

d. 将上述浓缩液用0.22μm的滤膜过滤后冷冻干燥，制得乙醇残留小于200ppm的依诺肝素钠。

本发明具有的有益效果为：1. 本发明通过将依诺肝素钠沉淀用纯化水溶解后先进行纳滤预处理再进行冷冻干燥的工艺，可将依诺肝素钠的乙醇残留降低至200ppm以下，远优于药典标准，比药典标准降低25倍以下，有效提高了产品质量。2.本发明不引入其它杂质，不影响依诺肝素钠原料的其它质量标准。3.本发明为纯物理过程，纳滤结合冷冻干燥的方式能更好的保护产品的活性，一次冻干就能使乙醇残留降至200ppm以下，有效减少了冻干次数，操作过程便捷，降低了成本，适合大规模生产，具有很好的推广价值。

具体实施方式

实施例1：

纳滤前的准备：

主要设备：纳滤机（滤膜2000Da）、不锈钢罐储罐、透过液不锈钢储罐、冻干机。

初始物料：经乙醇沉淀得到的依诺肝素钠沉淀物30kg（湿品）。

具体操作过程如下：

a. 将上述30kg依诺肝素钠沉淀物湿品加600L纯化水溶解得到5%质量体积浓度的依诺肝素钠水溶液后，经0.22μm滤膜过滤，滤液至不锈钢储罐，打开纳滤机进料口、回流液管路阀门并开启物料泵，然后将上述滤液循环60分钟后混合均匀；

b. 打开透过液出口，开启高压泵，调整高压泵频率为40Hz，调整回流管路阀门，使进膜压力为1.0Mpa时进行循环纳滤，在循环纳滤过程中，透过液流出200L的过程中持续补加200L纯化水至储罐中；

c. 当透过液的体积达到1200L时停止补水，然后再继续纳滤至体积为400L的依诺肝素钠浓缩液；

d. 将上述浓缩液用0.22μm的滤膜过滤后装盘，冷冻干燥，经检测，冻干品依诺肝素钠中乙醇残留为138ppm。

实施例2：

本实施例与实施例1不同之处是：