[发明专利]一种偶联抗体的主动靶向载药长循环脂质体及其制备方法

说明书

本发明公开了一种偶联抗体的主动靶向载药长循环脂质体及其制备方法。该靶向长循环脂质体包括抗体、化疗药和脂质体；所述的抗体为抗血管内皮生长因子单克隆抗体；所述的化疗药物为奥沙利铂；所述的长循环脂质体包含磷脂、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇2000。抗体偶联奥沙利铂脂质体，其制备原料含有磷脂、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇2000、新型抗血管内皮生长因子单克隆抗体(抗VEGF单克隆抗体)和抗肿瘤药物奥沙利铂。目前已获得初步结果，抗体偶联率为43.76％，抗体的活性保持为84.16％，表明这种主动靶向脂质体可有效与血管内皮生长因子特异性结合，从而达到减毒增效的作用。

技术领域

本发明涉及一种主动靶向载药长循环脂质体技术，属于医药制备的技术领域。

背景技术

目前肝细胞癌是我国高发和常见的恶性肿瘤，发病率和死亡率均居全球之首。虽有多种治疗手段，包括外科手术、局部消融、肝动脉介入、化疗以及放疗等，但能够手术者仅有15％，而在临床上大多数肝细胞癌在确诊时已达中晚期，局部消融、肝动脉介入和药物治疗成为主要的姑息治疗手段，但是改善生存的作用有限。因此，迫切需要寻找新的突破性治疗手段。

肿瘤生长与血管生成密切相关，选择参与血管生成过程的重要因子或关键环节作为靶点，可以靶向调控肿瘤的生长和转移，达到治疗肿瘤的目的。抗血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)是促进肿瘤血管生成的重要靶分子，与肿瘤的发生、发展密切相关。而肝细胞癌为典型的富血管恶性肿瘤，肿瘤细胞大量分泌VEGF，并通过自分泌和旁分泌两种途径促进肿瘤生长和血管生成，本发明选择抗VEGF单克隆抗体为主动靶向纳米制剂的靶头，同时此种单抗也可以通过中和肿瘤部位的VEGF，达到抗肿瘤细胞增殖和抗血管生成作用。

奥沙利铂是继顺铂和卡铂之后的第三代铂类衍生物，是临床上治疗胃肠道肿瘤的常见药物，其作用机制是在细胞内产生烷化结合物与DNA形成链内和链外交联，抑制DNA的合成和复制，产生细胞毒作用和抗肿瘤活性。近年一项大型临床研究(EACH研究)结果表明，含奥沙利铂联合化疗方案治疗亚洲晚期肝细胞癌患者安全有效，可为肝细胞癌患者带来病情的局部控制和生存获益。但是，剂量限制性毒性大大制约了奥沙利铂临床疗效的发挥。因此，迫切需要寻找新的剂型来提高奥沙利铂的疗效，减少其毒副作用，为患者带来更好的治疗途径。

目前关于奥沙利铂脂质体的研究较为广泛，但尚未见抗血管内皮生长因子单克隆抗体偶联奥沙利铂脂质体的相关研究报道。本发明采用抗VEGF单克隆抗体偶联奥沙利铂脂质体，既能有效提高奥沙利铂的生物利用度，减少其毒副反应，又能实现发挥单抗靶向和抗肿瘤双重作用。

发明内容

技术问题：为了充分利用抗VEGF单克隆抗体的靶向作用和抗血管生成作用，以及提高奥沙利铂药物的生物利用度并减轻毒副作用，本发明提供一种偶联抗体的主动靶向载药长循环脂质体及其制备方法将抗VEGF单克隆抗体偶联到奥沙利铂脂质体上，使其构成新型主动靶向纳米制剂。

技术方案：本发明的一种偶联抗体的主动靶向载药长循环脂质体，该靶向长循环脂质体包括抗体、化疗药和脂质体；所述的抗体为抗血管内皮生长因子单克隆抗体；所述的化疗药物为奥沙利铂；所述的长循环脂质体包含磷脂、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000。

其中,

所述的抗血管内皮生长因子单克隆抗体为抗VEGF单克隆抗体。

所述的抗体、化疗药和脂质体的质量比为：0.2-0.5:0.1-0.4:15。

所述的磷脂、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000的质量比为：

3-5:1:0.5-1.25。

本发明的偶联抗体的主动靶向载药长循环脂质体的制备方法为：