[发明专利]制备性体外克隆的方法

权利要求书

1.一种分离靶核酸的方法，所述方法包括：

(a)提供包含多个不同核酸分子的核酸分子群；

(b)提供多个寡核苷酸标签；

(c)使所述寡核苷酸标签连接至所述多个核酸分子的一个末端，从而产生核酸－寡核苷酸标签分子亚群；

(d)采用与所述多个寡核苷酸标签互补的引物扩增所述多个核酸－寡核苷酸标签分子；和

(e)分离所述核酸－寡核苷酸标签分子亚群的至少一个靶核酸－寡核苷酸标签分子。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还对至少一个分离的靶核酸－寡核苷酸标签分子测序。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法还鉴定所述靶核酸。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述测序步骤通过高通量测序进行。

5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法还扩增至少一个靶核酸－寡核苷酸标签分子。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分离步骤通过有限稀释进行。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法还扩增所述靶核酸－寡核苷酸标签分子。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶核酸具有预确定的序列。

9.一种分离靶核酸的方法，所述方法包括：

(a)提供包含多个不同核酸分子的群；

(b)提供多个微粒，其中各微粒均具有固定在其表面上与所述核酸分子的部分互补的寡核苷酸序列；

(c)形成与所述微粒上的互补性寡核苷酸序列杂交的核酸分子群；并

(d)分离至少一个靶核酸分子。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，各所述微粒在其表面具有单一互补序列。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述互补性寡核苷酸序列相同。

12.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述互补性寡核苷酸序列不同。

13.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述多个核酸分子在一个末端包含寡核苷酸标签。

14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述多个核酸分子具有相同的寡核苷酸标签。

15.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述多个核酸分子具有不同的寡核苷酸标签。

16.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述分离步骤通过有限稀释进行。

17.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述方法还扩增至少一个靶分子。

18.一种分离靶核酸的方法，所述方法包括：

(a)提供包含多个不同核酸分子的群；

(b)提供所述核酸分子的群的稀释物；

(c)将所述核酸分子分入多个样品，所述样品包含单一核酸分子或较小数量的核酸分子；

(d)扩增来自步骤c的核酸分子，从而形成经扩增的核酸分子；

(e)可任选地在不含核酸分子的样品中重复步骤c和d；和

(f)分离至少一个靶核酸分子。

19.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述靶核酸具有预确定的序列。

20.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述方法还对至少一个所述靶分子测序。