[发明专利]疫苗用中药免疫增强剂及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于兽用生物制品领域，具体涉及一种疫苗用中药免疫增强剂及其制备方法与应用。

背景技术

免疫增强剂能激活一种或多种免疫活性细胞，增强机体特异性和非特异性免疫功能，使低下的免疫功能恢复正常；增强与之合用的抗原的免疫原性，加速诱导免疫应答反应；部分疫苗用中药免疫增强剂对机体的免疫功能产生双向调节作用，使过高或过低的免疫功能趋于正常。

猪瘟是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)引起的一种高度接触性传染病，不同年龄、性别和品种的猪均能感染，死亡率高达80-90％。猪瘟也是危害我国养猪业的最重要疫病，中国学者培育成功的猪瘟兔化弱毒苗是目前世界上公认的安全和有效的疫苗，使用C株疫苗密集接种和综合防制措施已成为防治该病的最有效手段。

猪瘟疫苗在使用时需要用疫苗稀释剂稀释成混悬液，市场上通常选用注射用水、生理盐水或PBS(磷酸盐缓冲液)等作为稀释剂直接稀释猪瘟活疫苗。但在临床使用中也发现，猪瘟疫苗在制备、成品检验、运输及使用过程均符合要求的情况下，接种后仍出现免疫效果不佳，甚至免疫失败的案例。经研究，这些情况的出现与动物机体的免疫功能异常、猪瘟活疫苗在复苏过程遇环境突变造成抗原损失等有关。因此，本发明提供一种疫苗用中药免疫增强剂，该疫苗用中药免疫增强剂可调节机体免疫系统，增强动物机体的免疫功能；减小复苏过程抗原损失；同时有效刺激机体产生保护性应答，增强猪瘟活疫苗免疫效果。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种疫苗用中药免疫增强剂及其制备方法。本发明的疫苗用中药免疫增强剂可调节机体免疫系统，增强动物机体的免疫功能；减小复苏过程抗原损失；同时有效刺激机体产生保护性应答，增强猪瘟活疫苗免疫效果。

为实现发明目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明的疫苗用中药免疫增强剂是由牛膝多糖、MEM干粉、胸腺五肽、HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)和水制成的混合溶液，每1000ml疫苗用中药免疫增强剂中各组分的含量为：牛膝多糖15-30g、MEM干粉8-18g、胸腺五肽2-10g、HEPES 2-3g，余量为水。

根据上述的疫苗用中药免疫增强剂，优选地，每1000ml疫苗用中药免疫增强剂中各组分的含量为：牛膝多糖25g、MEM干粉13.4g、胸腺五肽5g、HEPES2.38g，余量为水。

根据上述的疫苗用中药免疫增强剂，所述水优选为注射用水，更优选为灭菌注射用水。

根据上述的疫苗用中药免疫增强剂，优选地，所述牛膝多糖的制备方法为：取新鲜牛膝根晒干(含水率<7％)，经粉碎后加水进行提取，得到水提液，向水提液中加入95％乙醇进行沉淀，抽滤后再向滤液中加入1％鞣酸进行沉淀，抽滤后的滤液经活性炭脱色、过滤透析、真空浓缩、乙醇沉淀、丙酮脱水、真空干燥等处理后得到牛膝多糖粗粉；牛膝多糖粗粉再分别经DEAE-Sepharose fast-flow色谱柱、SephadexG-150色谱柱纯化，透析脱盐，减压浓缩，冷冻干燥，得到牛膝多糖。

上述疫苗用中药免疫增强剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)按上述的疫苗用中药免疫增强剂的原料组成称取各原料组分，备用；

(2)取总用量85％的水，向其中加入将牛膝多糖、MEM干粉、胸腺五肽和HEPES，搅拌溶解均匀，得到混合溶液，调节其PH为7.2-7.4(用0.01mol/l HCL或NaOH溶液调节混合溶液的PH值)；对混合溶液进行过滤除杂(用0.45μm滤膜进行过滤除杂)，然后用余量的水将混合溶液的体积补足至1000ml，过滤除菌(用0.22μm滤膜进行过滤除菌)，即得疫苗用中药免疫增强剂。

本发明的另一目的是提供了上述疫苗用中药免疫增强剂的应用：

本发明的疫苗用中药免疫增强剂可以作为日常提高猪抵抗力和免疫力的注射针剂使用(提高猪对疫病的抵抗力)；其用量为：每头猪肌肉注射1-2ml本发明疫苗用中药免疫增强剂，每月使用一次。

本发明的疫苗用中药免疫增强剂还可以作为疫苗稀释剂使用；所述疫苗优选为猪瘟活疫苗(猪瘟活疫苗指兔源、细胞源)。本发明疫苗用中药免疫增强剂作为猪瘟活疫苗稀释剂使用时，其用量为：每头份猪瘟活疫苗用1-2ml疫苗用中药免疫增强剂进行稀释。