[发明专利]消除脂血干扰的葡萄糖氧化酶测定方法有效
申请号: | 201711116983.5 | 申请日: | 2017-11-13 |
公开(公告)号: | CN107884401B | 公开(公告)日: | 2020-03-24 |
发明(设计)人: | 李立和;丁弘;刘成旺 | 申请(专利权)人: | 天津市宝坻区人民医院 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N21/31 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 301800*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 消除 干扰 葡萄糖 氧化酶 测定 方法 | ||
1.一种消除脂血干扰的葡萄糖氧化酶测定方法,其特征在于:试剂Ⅰ中含有脂蛋白脂肪酶,甘油脱氢酶,NAD+,Triton X-100,变旋酶;试剂Ⅱ中含有葡萄糖氧化酶,过氧化物酶,4-氨基安替比林,2,4-二氯酚;其测定方法为:血清先与试剂Ⅰ于37℃温浴3~5分钟,甘油三酯在脂蛋白脂肪酶,甘油脱氢酶的作用下转变为二羟丙酮;加入试剂Ⅱ后,葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下生成过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下,与4-氨基安替比林,2,4-二氯酚缩合成红色醌亚胺,仪器以第一步反应为空白,由第二步产生的醌亚胺计算出葡萄糖的含量;
计算公式为:
ODGLU=OD2-OD1×[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]
葡萄糖浓度=F×ODGLU
其中ODGLU是葡萄糖产生的吸光度,OD1是样品加入试剂Ⅰ反应后测得的吸光度,OD2是样品加入试剂Ⅱ反应后测得的吸光度,SV是血清样品的体积,R1V1是试剂Ⅰ的体积,R2V2是试剂Ⅱ的体积,F是校正因数。
2.根据权利要求1所述消除脂血干扰的葡萄糖氧化酶测定方法,其特征在于:试剂I中每升 0.1mol磷酸盐缓冲液中含有NAD+ 2.0~10.0 mmol,脂蛋白脂肪酶200~ 400U,甘油脱氢酶500~1000U,Triton X-100 0.10g~0.20g,硫酸镁1.5~2.5mmol,变旋酶1.0~2.0KU、Proclin-300防腐剂100μl~300μl,其中,Triton X-100为脂蛋白解离剂,脂蛋白脂肪酶,甘油脱氢酶为甘油三酯分解酶;试剂Ⅱ中每升0.1mol磷酸盐缓冲液含有抗坏血酸氧化酶6~10KU、葡萄糖氧化酶10~20KU、过氧化物酶10~20KU、4-氨基安替比林0.4~0.60mmol,2,4-二氯酚0.4~0.6mmol, Proclin-300 100μl~300μl。
3.根据权利要求1所述消除脂血干扰的葡萄糖氧化酶测定方法,其特征在于试剂Ⅰ和试剂Ⅱ中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0±0.2。
4.根据权利要求1所述消除脂血干扰的葡萄糖氧化酶测定方法,其特征在于测定的体积比为:样品∶试剂I∶试剂II=1∶70~80∶70~80。
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