[发明专利]一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法

说明书

技术领域

本发明属于烟草化学成分分析领域，涉及一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法。

背景技术

烟碱是烟草和烟气中含量最丰富的生物碱，占生物碱总含量的90％～95％，可作用于人体中枢神经系统，是吸烟者吸烟的主要动力。烟碱含有一个手性中心，存在两个对映体：S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱，两者在烟草中含量、代谢机理和生理特性完全不同。天然烟草中的烟碱主要为S-(-)-构型，但通过高灵敏度的分析技术，可在不同类型的烟草原料中检测到占总烟碱含量1％以内的R-(+)-烟碱。

降烟碱的含量通常低于总生物碱的5％，是烟碱的降解产物，对烟草香味存在影响，也存在两个对映体。目前对降烟碱手性组成的研究很少，分析表明，不同烟草及烟草制品中降烟碱的手性组成不同，有待进一步深入研究。

由于烟碱两个对映体含量差别极大，对方法的灵敏度要求较高，而方法灵敏度与S-(-)-烟碱、R-(+)-烟碱的分离度密切相关；同时基于烟草较为复杂的基质，有效排除杂质干扰是方法准确度的保证。超高效合相色谱结合了超临界流体色谱技术，兼具传统超高效液相色谱的优点，以超临界流体CO₂为流动相主体，依靠流动相的溶剂化能力来进行分离。由于超临界流体CO₂具有低粘度、高扩散速率和高质量转移能力的特点，其在手性化合物及相似物分离领域具有独特优势。将超高效合相色谱与质谱联用，分离度与选择性兼具，可实现烟碱与降烟碱手性异构体的同时检测。目前，未见关于超高效合相色谱与质谱联用法用于烟草及烟草制品中烟碱与降烟碱手性组成同时分析的报道。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，以烟碱和降烟碱为研究对象，对烟草及烟草制品进行前处理方法研究和超高效合相色谱-串联质谱条件优化，建立了烟碱和降烟碱的超高效合相色谱-串联质谱手性分析方法。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，具体包括以下步骤：

1)样品前处理：取烟草及烟草制品磨粉后获得烟末样品，将烟末样品加入NaOH溶液和甲基叔丁基醚，充分振荡后静置，取上层清液过滤后加入有机溶剂稀释，获得待测液；

2)样品检测：将步骤1)配制的待测液进行超高效合相色谱-串联质谱检测，采用峰面积归一化法测定待测液中烟碱和降烟碱的手性组成的相对含量。

优选地，所述烟碱包括有S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱。所述S-(-)-烟碱与R-(+)-烟碱是手性异构体。所述烟碱为外消旋烟碱。

优选地，所述降烟碱包括有S-(-)-降烟碱和R-(+)-降烟碱。所述S-(-)-降烟碱与R-(+)-降烟碱是手性异构体。所述降烟碱为外消旋降烟碱。

优选地，步骤1)中，所述烟草及烟草制品选自烟叶、烟梗、烟用薄片或烟丝中的任意一种。

更优选地，所述烟叶选自白肋烟烟叶、香料烟烟叶或烤烟烟叶中的一种。

更优选地，所述烟丝为卷烟烟丝。

优选地，步骤1)中，所述NaOH溶液为重量百分比为5-15％NaOH水溶液。更优选地，所述NaOH溶液为重量百分比为10％NaOH水溶液。

优选地，步骤1)中，所述烟末样品加入质量(g)与NaOH溶液加入的体积(mL)之比为1:1-5。更优选地，所述烟末样品加入质量(g)与NaOH溶液加入的体积(mL)之比为1:2。

优选地，步骤1)中，所述烟末样品加入质量(g)与甲基叔丁基醚加入的体积(mL)之比为1:2-8。更优选地，所述烟末样品加入质量(g)与甲基叔丁基醚加入的体积(mL)之比为1:4。

优选地，步骤1)中，所述振荡时间为1-10min。更优选地，所述振荡时间为5min。

优选地，步骤1)中，所述静置条件为：静置温度为室温；静置时间为6-18h。更优选地，所述静置条件为：静置温度为20-25℃；静置时间为10-14h。

优选地，步骤1)中，所述有机溶剂为甲基叔丁基醚。

优选地，步骤1)中，所述上层清液与有机溶剂加入的体积之比为1:1-100。

优选地，步骤1)中，所述过滤方式为滤膜过滤方式。更优选地，所述滤膜的孔径为0.22μm。