[发明专利]一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法

权利要求书

1.一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，具体包括以下步骤：

1)样品前处理：取烟草及烟草制品磨粉后获得烟末样品，将烟末样品加入NaOH溶液和甲基叔丁基醚，充分振荡后静置，取上层清液过滤后加入有机溶剂稀释，获得待测液；

2)样品检测：将步骤1)配制的待测液进行超高效合相色谱-串联质谱检测，采用峰面积归一化法测定待测液中烟碱和降烟碱的手性组成的相对含量。

2.根据权利要求1所述的一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，其特征在于，所述烟碱包括有S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱，所述降烟碱包括有S-(-)-降烟碱和R-(+)-降烟碱。

3.根据权利要求1所述的一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，其特征在于，步骤1)中，所述烟草及烟草制品选自烟叶、烟梗、烟用薄片或烟丝中的任意一种。

4.根据权利要求1所述的一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，其特征在于，步骤1)中，所述NaOH溶液为重量百分比为5-15％NaOH水溶液；所述烟末样品加入质量g与NaOH溶液加入的体积mL之比为1:1-5。

5.根据权利要求1所述的一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，其特征在于，步骤1)中，所述烟末样品加入质量g与甲基叔丁基醚加入的体积mL之比为1:2-8。

6.根据权利要求1所述的一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，其特征在于，步骤1)中，所述振荡时间为1-10min；所述静置条件为：静置温度为室温；静置时间为6-18h。

7.根据权利要求1所述的一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，其特征在于，步骤1)中，所述有机溶剂为甲基叔丁基醚；所述上层清液与有机溶剂加入的体积之比为1:1-100。

8.根据权利要求1所述的一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，其特征在于，步骤2)中，所述超高效合相色谱的检测条件为：串联手性柱：分析柱1：改性多聚糖固定相手性色谱柱；分析柱2：正相手性液相色谱柱；流动相：超临界CO₂流体-含异丙胺的甲醇溶液，其中，A相为超临界CO₂流体，B相为含体积百分比为0.02-0.08％异丙胺的甲醇溶液；流动相流速：1.0-1.2mL/min；ISM补偿流路流动相：含体积百分比为0.05-0.15％甲酸的甲醇溶液；ISM补偿流路流动相流速：0.2-0.4mL/min；分析时间：32min；梯度洗脱。

9.根据权利要求8所述的一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序的具体为：0-0.5min，A相：B相体积比为97：3-97：3；0.5-8.0min，A相：B相体积比为97：3-92：8；8.0-12.0min，A相：B相体积比为92：8-92：8；12.0-30.0min，A相：B相体积比为92：8-90：10；30.0-32.0min，A相：B相体积比为90：10-97：3。

10.根据权利要求8所述的一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，其特征在于，所述超高效合相色谱还包括有以下检测条件：柱温：35-45℃；进样室温度：8-12℃；进样量：1-10μL；背压：1550-1850psi。

11.根据权利要求1所述的一种烟草及烟草制品中烟碱和降烟碱的手性分析方法，其特征在于，步骤2)中，所述质谱的检测条件为：离子源：ESI源；扫描方式：正离子扫描；离子源温度：300℃；电喷雾电压：5000V；雾化气压力：40psi；检测方式：多反应监测MRM。