[发明专利]具有化疗药物抗性的通用型CART/TCRT细胞及其构建方法有效

专利信息
申请号: 201711082910.9 申请日: 2017-11-07
公开(公告)号: CN107746831B 公开(公告)日: 2019-04-23
发明(设计)人: 贺小宏;王延宾;袁鹏 申请(专利权)人: 南京北恒生物科技有限公司
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N15/113
代理公司: 南京众联专利代理有限公司 32206 代理人: 顾进
地址: 210046 江苏省南*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 通用型 化疗药物 细胞 激酶分子 抗性 脱氧 构建 敲除 合成生物学 基因工程 嵌合抗原 细胞制剂 靶向性 低成本 高活性 敏感度 抗原 简易 肿瘤 排斥 保留
【权利要求书】:

1.具有化疗药物抗性的通用型CART/TCRT细胞的构建方法,其特征在于,所述通用型CART/TCRT细胞是具有嵌合抗原受体和T细胞受体的异体T细胞,所述T细胞受体α、β 链和脱氧胞苷激酶分子被敲除;

所述T细胞受体α、β 链和脱氧胞苷激酶分子的敲除技术为CRISPR技术;

采用CRISPR技术所使用的sgRNA和crRNA序列为:

sgRNA-TCRα:AGAGTCTCTCAGCTGGTACA(SEQ ID NO.10)

sgRNA-TCRβ:GCTGTCAAGTCCAGTTCTAC(SEQ ID NO.13)

sgRNA-dCK:TTCCTGAACCTGTTGCCAGA(SEQ ID NO.26)

crRNA-TCRα:ATTCTCAAACAAATGTGTCACAA(SEQ ID NO.36)

crRNA-TCRβ:AGCCATCAGAAGCAGAGATCTCC(SEQ ID NO.40)

crRNA-dCK: TGAATATCCTTAAACAATTGTGTG(SEQ ID NO.47)。

2.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述嵌合抗原受体为靶向CD19、CD20、CD22、CD30、CD33、CD38、CD123、CD138、CD171、MUC1、AFP、Alpha folate receptor 、CEA、PSCA、PSMA、Her2、EGFR、IL13Rα2、GD2、NKG2D、EGFRvIII、CS1、BCMA或Mesothelin的嵌合抗原受体。

3.如权利要求1所述的的构建方法,其特征在于,所述T细胞受体为靶向HBV、HPV E6、NY-ESO、mNY-ESO、WT1、MART-1、MAGE-A3、MAGE-A4、P53、Thyroglobulin或Tyrosinase的T细胞受体。

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