[发明专利]一种牡丹籽活性肽及制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牡丹籽活性肽及制备方法。

背景技术

牡丹是毛茛科、芍药属植物，为多年生落叶小灌木。将牡丹的根加工制成“丹皮”，是名贵的中草药。其性微寒，味辛，无毒，入心、肝、肾三经，有散瘀血、清血、牡丹和血、止痛、通经之作用，还有降低血压、抗菌消炎之功效。久服可益身延寿、养血和肝、散郁祛瘀，适用于面部黄褐斑、皮肤衰老，常饮气血活肺、容颜红润，改善月经失调、痛经，止虚汗、盗汗。牡丹籽是牡丹植株的精华结晶，传承了牡丹本身具有的一切特性外，它更有自己独特的医药和营养成分，牡丹种子是受果壳和种壳双层保护的坚果，具有天然的“长寿”基因。

申请号CN201610134873.0公开了“一种牡丹籽降血糖肽及其纯化方法和应用”其制备方法如下：(1)牡丹籽脱脂粉与水混合均匀，超声搅拌提取蛋白，离心，所得沉淀重复提取两次，合并上层液体并使用1mol/L HCl调节pH至4～4.5，离心，取沉淀进行冷冻干燥，得牡丹籽蛋白；(2)配制1～3％牡丹籽蛋白溶液，使用胰蛋白酶超声辅助酶解，反应结束，沸水浴10～15min进行灭酶，即可得到牡丹籽降血糖肽。在酶解过程中使用胰蛋白酶单一酶酶解，不利于蛋白质的彻底酶解。在分离纯化过程中使用树脂进行离子交换吸附、C～18反相色谱柱分离，其成本昂贵，不适合工业化生产。最后采用冷冻干燥而不是喷雾干燥，不利于工业化应用。

公开号CN104041901B公布了“一种牡丹肽饮料及其制备方法”，其中制备牡丹肽步骤如下：1牡丹籽仁用pH值为8.5～9.5的稀碱水浸泡除杂，洗涤、晾干、炒制得到炒牡丹籽仁；2加水研磨得到牡丹籽浆液；3调节PH值为7.5～9.6，然后加入培养成熟的混合蛋白酶，并使牡丹籽浆液中蛋白酶的质量百分数为0.6～1.2％，保持温度为40～50℃，控制搅拌桨搅拌转数为100～200r/min，在无菌空气下水解24～48h，水解结束后升温至110～120℃进行高温灭活，过滤除渣，即制得牡丹肽溶液。酶解时间过长且需要无菌环境，对工厂的设备要求太高，且浪费时间成本。过滤步骤也只是简单提起过滤除渣，未用过滤剂以及滤膜进一步处理。不利于牡丹肽的提纯和口感。

发明内容

本发明第一目的在于提供一种牡丹籽活性肽。

本发明的另一目的在于提供上述活性肽的制备方法。

一种牡丹籽活性肽的制备方法，包括以下步骤：

A、将牡丹籽预处理，进行超微粉碎，过200～500目，加水混合，调节pH 8～9微碱化处理，浸泡18～24h。机械搅拌、反应罐中的料液离心分离，收取上清液；

B、在上清液中加入弱酸，沉淀蛋白质。调节上清液的pH值至4～6后，机械搅拌、离心，收取沉淀，沉淀即为牡丹籽蛋白；

C、将沉淀加水复溶，加热，使得蛋白质变性，然后进行高压均质；

D、调节上述溶液pH至5～10，加入专用酶制剂，酶解；

E、酶解结束之后，加入特定中药组合，浸提灭酶结束后得粗酶解液；

F、将粗酶解液制成牡丹籽活性肽粉。

如上述的牡丹籽活性肽的制备方法，其特征在于，F步骤还包括：

F1：为将粗酶解液离心，然后过装有特制过滤助剂组合的板框压滤机过滤；

F2：将滤液采用孔径为20～500nm的陶瓷膜过滤，制得澄清的活性肽透过液；

F3：将步骤F2中滤液进行蒸发浓缩，然后喷雾干燥得到精制牡丹籽活性肽粉。

如上述的牡丹籽活性肽的制备方法，其特征在于，F步骤还包括：

F11：将粗酶解液直接旋转蒸发、均质乳化，然后喷雾干燥得到全营养牡丹籽活性肽粉。

如上述的牡丹籽活性肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤A中，进行超微粉碎可以提高酶解率，充分利用物质组分。

如上述的牡丹籽活性肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤B中，所述弱酸为醋酸、乳酸、柠檬酸中的一种或多种，时间8～12h。采用弱酸沉淀蛋白质，减少强酸对蛋白质营养物质的破坏，有利于优化活性肽的营养组分。

如上述的牡丹籽活性肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤C中，加热温度为75～100度，时间15～30分钟。采用热变性的方法，可以更加利于酶解，酶解更加充分。同时热变性之后进行高压均质，进一步提高酶解效率。

如上述的牡丹籽活性肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤D，专用酶制剂组合包括风味蛋白酶∶胰蛋白酶∶胃蛋白酶为1～2∶1～2∶2～3。研究发现其专用酶制剂组合的酶解效率远大约单一酶的酶解效率。