[发明专利]一种发状念珠藻的培养方法有效
申请号: | 201711056370.7 | 申请日: | 2017-11-01 |
公开(公告)号: | CN107629984B | 公开(公告)日: | 2020-10-30 |
发明(设计)人: | 曲树杰;黄超;朱爱国;李文刚;尤升波;于金慧;马德源;毕玉平 | 申请(专利权)人: | 山东省农业科学院试验基地服务中心;山东省农业科学院生物技术研究中心 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 孔娟 |
地址: | 250000 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 念珠 培养 方法 | ||
1.一种发状念珠藻的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)使用平板分离法对野外采集的发状念珠藻经分离纯化,得到藻种;
(2)将所述藻种接种于液体培养基中,在光照培养箱中培养得到接种藻体,其中,所述液体培养基包括BG11培养基;
(3)将所述接种藻体接种到固体培养基中,在室外定期补充水分保持固体培养基湿润,培养得到移植藻体,所述固体培养基中包括以下质量份数的原料:腐殖酸土100-150份、硅酸盐分子筛1-5份、藻酸盐0.2-0.7份、K2HPO4 1-5份、柠檬酸铁铵0.5-1份、脂肪醇0.5-1份和水500-800份;
(4)将所述移植藻体连同所述固体培养基转移到土壤中,定期浇水,培养即可得到成片的发状念珠藻;
所述液体培养基包括以下质量份数的原料:BG11培养基 70-90份、5-氨基乙酰丙酸0.05-0.1份和肌醇0.1-0.5份。
2.根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于,步骤(3)中,所述固体培养基还包括以下质量份数的原料:谷氨酰胺0.1-0.5份。
3.根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于,步骤(1)包括:
(1)将野外采集的发状念珠藻稀释,得到稀释藻液;
(2)将所述稀释藻液喷射在平板培养基上进行扩大培养,在室温、光照强度50-80μmol/(m2·s1)及光暗周期10/14下,扩大培养8-12天所得到的发状念珠藻细胞培养物作为藻种。
4.根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于,步骤(2)中,所述藻种的培养条件是:室温、光照强度30-50μmol/(m2·s1)和光暗周期12/12;
所述藻种在培养过程中,根据液体培养基的消耗,及时补充,并调整液体培养基的pH维持在6.5-7.5。
5.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于,步骤(2)中,所述液体培养基中各原料的质量份数为:BG11培养基 80份、5-氨基乙酰丙酸0.08份和肌醇0.3份。
6.根据权利要求3所述的培养方法,其特征在于,所述固体培养基中各原料的质量份数为:腐殖酸土120份、硅酸盐分子筛3份、藻酸盐0.5份、K2HPO4 2份、柠檬酸铁铵0.8份、脂肪醇0.7份、谷氨酰胺0.2份和水600份。
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