[发明专利]家禽活疫苗稀释液佐剂及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及家禽医药技术领域，尤其是一种家禽活疫苗稀释液佐剂及其制备方法与应用。

背景技术

佐剂(Adjuvant)又称免疫调节剂(Immunomodulator)或免疫增强剂(Immunoenhancement)，是指先于抗原或与抗原混合或同时注入动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用的一类物质。佐剂的英文名adjuvant来源于拉丁文“adjuvare”，意思为“帮助”。佐剂作为疫苗的主要成分其作用主要有：(1)使抗原缓慢释放；(2)延长抗原在体内停留时间；(3)扩大抗原的表面积；(4)促进局部的炎症反应；(5)增强吞噬细胞的吞噬与抗原提呈。

自从1925年法国免疫学家Ranmon发现在疫苗中加入某些与之无关的物质可以特异性地增强机体的免疫反应以来，至今免疫佐剂的发展已近90年。佐剂种类很多，按其性质可分为：矿物盐类佐剂、皂苷类佐剂、微生物衍生物类佐剂、油乳剂佐剂、微粒抗原递呈系统佐剂、细胞因子佐剂、多糖类佐剂等，其中目前最常用的是铝盐佐剂和油乳剂佐剂，但它们也有一些不可避免的缺点，如油佐剂存在粘滞性大、稳定性不佳及注射局部反应明显，在机体内降解吸收慢、残留时间长、影响肉品的外观及食用安全，不能有效刺激T细胞免疫，引起免疫抑制；铝盐佐剂则是不足以诱导较弱抗原的免疫反应且不能诱导细胞介导的免疫应答，皮下注射时常有持续性肉芽肿，不能很好的吸收。目前国内市场上活疫苗基本采用生理盐水或者磷酸盐缓冲液来进行稀释，稀释后的疫苗溶液不含免疫调节剂物质，病毒抗原不能良好的诱导机体产生非特异性与特异性免疫应答，因此新型的活疫苗免疫佐剂在市场上极具应用前景。

发明内容

本发明的目的是：提供一种家禽活疫苗稀释液佐剂及其制备方法与应用，将它应用在家禽活疫苗中能增强原有冻干疫苗免疫抗体水平，其制备方法简单易行。

本发明是这样实现的：家禽活疫苗稀释液佐剂，每1mL该稀释液佐剂中含有1mg左旋咪唑、0.3～1mg活性多糖、5mg转移因子、3mg 新鱼腥草素钠，其余为磷酸盐缓冲液。

所述的活性多糖为壳聚糖和菊粉多糖。

家禽活疫苗稀释液佐剂的制备方法，包括如下步骤：

A)配制高浓度母液：

1)左旋咪唑母液：将盐酸左旋咪唑干粉溶解于灭菌注射用水中，配制成浓度为100mg/mL的盐酸左旋咪唑液，将盐酸左旋咪唑液于 116℃湿热灭菌30min后，获得左旋咪唑母液，在4℃保存备用；

2)活性多糖母液：将壳聚糖与菊粉多糖粉末溶解于灭菌磷酸盐缓冲液中，配制得到含壳聚糖、菊粉多糖浓度分别为100mg/mL、 30mg/mL的活性多糖母液，4℃保存备用；

3)转移因子母液：将转移因子干粉溶解于灭菌磷酸盐缓冲液中，配制成浓度为500mg/mL的转移因子母液，过0.22μm滤膜除菌后4 ℃保存备用；

4)新鱼腥草素钠母液：将新鱼腥草素钠晶体粉末溶解于灭菌磷酸盐缓冲液中，配制成浓度为300mg/mL的新鱼腥草素钠母液，过 0.22μm滤膜除菌后4℃保存备用；

B)配制工作浓度稀释液佐剂：

按上述质量浓度比例分别取左旋咪唑母液，活性多糖母液，转移因子母液、新鱼腥草素钠母液及灭菌的磷酸盐缓冲液，将上述各组分混合均匀后，过0.22μm滤膜除菌，获得每1mL含左旋咪唑1mg、活性多糖0.3～1mg、转移因子5mg及新鱼腥草素钠3mg的疫苗稀释液佐剂。

家禽疫苗稀释液佐剂在家禽活疫苗中的应用，将家禽活疫苗与所述的疫苗稀释液佐剂按体积比为1:15～1:20混合溶解后，获得含佐剂的家禽活疫苗，以提高家禽活疫苗的免疫效果。

所述的家禽活疫苗为家禽传染性法氏囊病活疫苗，家禽新城疫活疫苗或家禽传染性支气管炎活疫苗。