[发明专利]一种可降低杂质的硫酸庆大霉素制备方法

权利要求书

1.硫酸庆大霉素的制备方法，其特征在于，其具体包括以下步骤：

1）取庆大霉素沙土孢子置于孢子斜面培养基上进行孢子培养，培养温度为36℃，培养时间为10天，得到斜面培养后的庆大霉素孢子；

2）将步骤1）中得到的斜面培养后的庆大霉素孢子进行摇瓶培养，摇瓶培养的孢子接入量为：孢子斜面挖取0.25cm²接入一个摇瓶，培养温度为36℃，培养时间为42小时，得到庆大霉素摇瓶菌丝；

3）将步骤2）得到的庆大霉素摇瓶菌丝置于种子培养基上进行种子培养，种子培养的接入量为：庆大霉素摇瓶菌丝按种子培养基体积的千分之二接入摇瓶种子，培养温度为36℃，培养时间为48小时，得到庆大霉素种子培养物；

4）将步骤3）得到的庆大霉素种子培养物置于繁殖罐中进行扩大培养，庆大霉素种子培养物接入量为扩大培养基体积的20%，培养温度为36℃，培养时间为42小时，得到庆大霉素繁殖培养物；

5）将步骤4）得到的庆大霉素繁殖培养物置于发酵培养基上进行发酵，庆大霉素繁殖培养物的接入量为发酵培养基体积的20%，发酵温度为34℃，发酵时间为120小时，得到庆大霉素发酵产物；

6）将步骤5）得到的庆大霉素发酵产物进行酸化处理至pH值为2-3，得到庆大霉素酸化液；

7）将步骤6）得到的庆大霉素酸化液进行中和处理，处理后得到pH值为6.8的庆大霉素溶液；

8）将步骤7）得到的庆大霉素溶液以732树脂进行吸附处理，得到吸附后庆大霉素溶液；

9）将步骤8）得到的吸附后庆大霉素溶液上柱去除Ca2+、Mg2+、Cl-1，得到去除离子的庆大霉素溶液；

10）将步骤9）得到的去除离子的庆大霉素溶液通过饱和树脂后以质量百分含量为4.5%的氨水进行解析，得到庆大霉素解析液；

11）将步骤10）得到的庆大霉素解析液以711树脂进行脱色，得到庆大霉素脱色液；

12）将步骤11）得到的庆大霉素脱色液以薄膜进行浓缩，得到庆大霉素浓缩液；

13）将步骤12）得到的庆大霉素浓缩液加入硫酸后制得硫酸庆大霉素；

14）将步骤13）得到硫酸庆大霉素通过喷雾干燥制得硫酸庆大霉素成品。

2.根据权利要求1所述的硫酸庆大霉素的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中庆大霉素沙土孢子的制备方法为：

a、庆大霉素沙土孢子培养基的配方按重量百分比计为：可溶性淀粉1.0%，氯化钠0.05%，硝酸钾0.1%， 碳酸钙0.1%，磷酸氢二钾0.02%，麸皮 1.8%，硫酸镁0.02%，琼脂 2.0%，三磷酸腺苷0.001%，甘氨酸0.001%；配制好的庆大霉素沙土孢子培养基在每个茄子瓶中分装50ml，经温热灭菌后，斜放，凝固，温热灭菌条件为0.1MPa，30分钟；

b、于超净工作台上，在火焰保护下，用无菌接种棒挑取砂土孢子0.1g于茄子瓶斜面培养基内，先划中线，而后从下而上往两边划线，均匀铺开，塞好棉塞；

c、培养与保存：接种好的斜面包扎好后，37℃恒温室架上培养10天，培养好的孢子斜面，4℃冰箱储存待用。

3.根据权利要求1所述的硫酸庆大霉素的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中，孢子斜面培养基的配方按重量百分比计为：可溶性淀粉1.0%，氯化钠0.05%，硝酸钾0.1%，碳酸钙0.1%，磷酸氢二钾0.02%，麸皮1.8%，硫酸镁0.02%，琼脂2.0%，三磷酸腺苷0.001%，甘氨酸0.001%，余量为水。

4.根据权利要求1所述的硫酸庆大霉素的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中，摇瓶培养基的配方按重量百分比计为：可溶性淀粉 1.0%，氯化钠0.05%，硝酸钾0.1%，碳酸钙0.1%，磷酸氢二钾0.02%，麸皮1.8%，硫酸镁0.02%，琼脂 2.0%，三磷酸腺苷0.001%，甘氨酸0.001%，余量为水。

5.根据权利要求1所述的硫酸庆大霉素的制备方法，其特征在于，所述步骤3）中，种子培养基的配方按重量百分比计为：淀粉1.5%，玉米粉1.5%，黄豆饼粉1.0%，硝酸钾0.05%，蛋白胨0.2%，二氯化钴0.0005%，三磷酸腺苷0.001%，甘氨酸0.001%，余量为水。