[发明专利]一种基于液液萃取-液相色谱-串联质谱同时测定植物油脂中黄曲霉毒素和香味剂的方法

说明书

本发明公开了一种基于液液萃取‑液相色谱‑串联质谱同时测定植物油脂中黄曲霉毒素和香味剂的方法，本发明的方法能够同时测定植物油中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素M1、黄曲霉毒素M2、香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素，样品经乙腈溶剂提取，超声辅助提取，提取溶液经正己烷净化后，在梯度条件下分析，目标分析物在多反应监测模式下以保留时间和离子对信息比较进行定性分析，外标法定量。本方法的优点：所需样品量和试剂量少，分析速度快、灵敏度高、重现性好，能同时实现黄曲霉毒素和常用香味剂的检测，为评价植物油脂样品的质量安全提供了新的检测方法。

技术领域

本发明涉及了一种同时测定植物油脂中6种黄曲霉毒素黄曲霉毒素B1(AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、黄曲霉毒素G2(AFG2)、黄曲霉毒素M1(AFM1)和黄曲霉毒素M2(AFM2)；3种香味剂香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素的方法，属于面向食品监测技术领域，具体涉及基于液液萃取-液相色谱-串联质谱正离子模式测定方法。

背景技术

食用植物油包括菜籽油、大豆油、玉米油、花生油、橄榄油、芝麻油、葵花籽油等，是日常生活的必需品，人类每天都会以不同的形式摄入一定量的植物油，随着现代生活水平的提高，人们不仅对植物油的质量、营养、品味等方面的要求越来越高，而且针对植物油的食用安全也日益关注。由于农作物种子在存储过程中极易导致黄曲霉毒素产生，鉴于黄曲霉毒素的强致癌性，因此在食用植物油加工过程中是否有黄曲霉毒素残留已引起人们越来越多的关注。此外在品位上，研究表明植物油脂中含有吡嗪类、呋喃类、吡啶类、吡咯类、噻唑类、酚类、酮类和芳香类化合物等天然物质，对植物油的香气贡献很大，我国GB2760-2011《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》明确规定植物油脂中禁止添加任何食用香料，为了避免我国不少商家为了追求最大利益违法添加香料，以至出现“香精大米”和“香精包子”等事件，针对食用植物油开展常用香味剂的检测也逐渐引起人们的重视。

目前，涉及本发明的6种黄曲霉毒素和3种香味剂的检测方法较多，主要包括高效液相色谱法、气相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱-质谱法、离子色谱法等，其中液相色谱-质谱法因具有高的检测灵敏度日益受到人们的关注。目前针对植物油基质开展6种黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2；3种香味剂香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素同时检测的方法在国、内外尚并未见报道。

食用植物油作为最重要的饮食之一，几乎包含在人们的一日三餐中。如果植物油中黄曲霉毒素含量超标或非法添加香味剂，长期食用将会对人体健康产生严重危害，因此建立食用植物油中6种黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2；3种香味剂香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素的同时检测方法具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的正是基于上述现有技术状况而提供了一种快速、简便、高效，同时测定植物油脂中6种黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2；3种香味剂香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素的方法。

本发明的技术方案：

一种基于液液萃取-液相色谱-串联质谱同时测定植物油脂中黄曲霉毒素和香味剂的方法，步骤如下：

(1)液液萃取：向待测油脂和空白油脂样品中加入提取溶剂，涡旋震荡、超声和离心，得到上层清液，待净化；

(2)液液分配净化：在上层清液中添加净化熔剂，涡旋振荡，离心后，取下层清液，过微孔滤膜，得待测液和空白基质提取液；

(3)标准溶液配制：首先，将质量比为1的香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素用甲醇溶解并定容，得1.0mg/mL标准储备液，再用乙腈稀释至1.0mg/L混合标准储备液1；

分别配制浓度为0.1mg/L的黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2标准溶液，为混合标准储备液2；