[发明专利]一种含益生菌提取活性因子的眼用制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种含益生菌提取活性因子的眼用制剂，其特征在于，包括如下组分：

其中，所述EM因子为益生菌的提取物溶液。

2.如权利要求1所述的含益生菌提取活性因子的眼用制剂，其特征在于，包括如下组分：

3.如权利要求1所述的含益生菌提取活性因子的眼用制剂，其特征在于，包括如下组分：

4.如权利要求1～3任一项所述的含益生菌提取活性因子的眼用制剂，其特征在于，所述EM因子通过如下方法得到：

(1)将益生菌置于溶剂中得混合液，采用物理方法裂解益生菌，并离心，取上清液；

(2)将上清液加入阴离子交换柱进行分离，分别收集每个组分；

(3)检测并去除无多糖的组分以及含有蛋白质的组分，即粗品；

(4)将粗品进一步通过疏水层析、分子排阻提纯。

5.如权利要求4所述的含益生菌提取活性因子的眼用制剂，其特征在于，所述益生菌选自双歧杆菌属、乳酸杆菌属或拟杆菌属中的任意一种或几种。

6.根据权利要求4所述的含益生菌提取活性因子的眼用制剂，其特征在于：所述步骤(1)中混合液中菌的重量百分数为5％～45％；

所述裂解的方法选自超声波裂解仪裂解、组织破碎仪裂解或高压均质机等物理方法裂解方式中的任意一种或几种；

所述离心的条件为8000g～30000g/分，时间是10～60分钟。

7.如权利要求4所述的含益生菌提取活性因子的眼用制剂，其特征在于,所述步骤(2)中洗脱前使用平衡液调整阴离子交换柱，所述平衡液选自10-300mM、pH 6.5-8.5的Tris-HCl溶液或10-200mM pH 6-9的磷酸溶液；

所述洗脱液选用10-300mM Tris-HCl/1M氯化钠溶液或10-200mM的磷酸溶液/1M氯化钠溶液；pH为6.0-8.5。

8.如权利要求4所述的益生含益生菌提取活性因子的眼用制剂，其特征在于，所述步骤(4)将粗品进一步通过包括分子排阻层析和滤膜进一步纯化，所述分子排阻层析中平衡液选自10-300mM pH 6.5-8.5的Tris-HCl溶液或10-200mM pH 6-9的磷酸溶液；收集多糖组分并通过孔径小于等于0.22μm的滤膜。

9.一种如权利要求1～3任一项所述的含益生菌提取活性因子的眼用制剂的制备方法，包括如下步骤：将各原料组分混合均匀后，经过活性碳吸附纯化，去除可能的内毒素；离心去除活性炭，再过0.22微米膜过滤去除剩余杂质；进而进行分装，然后高温湿热灭菌，最后进行包装。

10.如权利要求9所述的含益生菌提取活性因子的眼用制剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法在万级洁净度环境中进行。