[发明专利]一种白及组培苗的快繁生长技术

权利要求书

1.一种白及组培苗的快繁生长技术，其特征在于包括以下步骤：

1）选种：选择经过种源筛选的白及作为种源；

2）果荚的获取：将经过步骤1）选种的白及进行人工培育得到果荚，所述的果荚的采集时间为10月下旬至11月上旬，成熟度为果荚呈灰黑色，保证果荚无破损；

3）植物组织培养：

A、消毒：将操作用具和果荚分别消毒，所述的果荚消毒为将果荚先用0.2%升汞浸泡10-20分钟，再用75%酒精浸泡5-10分钟；

B、初代培养：把消毒后的果荚一端切开口，然后把种子均匀的撒在初代培养基上，然后培养15~30天，培养条件为温度控制在19~20℃，光照强度为1500lux-2000lux，光照时间为5-6h；

初代培养基的配制以40L为基数：

（1）称取白糖850g~920g、琼脂120g~200g，将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；

（2）配制母液：取大量元素400ml~600ml，微量元素100ml~200ml，铁盐60ml~70ml，有机成分60ml~70ml，NAA60ml~70ml，氯化钙120ml~200ml，肌醇60ml~70ml，生长素60ml~100ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（1）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述初代培养基的pH值在4.6~7.5，母液中大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁，微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸，铁盐为硫酸亚铁，有机成分包括烟酸、VB6、VB1，生长素为6B-A；

C、继代增殖培养：将初代培养获得的培养物切分为12~17粒一丛，再做去顶处理，切去苗尖，保留下端茎体1.5~2.5cm，反复转移5~6次到新的继代增殖培养基上，进行扩大增殖培养，待芽苗繁殖到苗高为2.5~3.5cm后，再将一部分接种到分化培养基，每丛间距0.8~1.2cm，每瓶分化培养基中接种10~15丛，培养无根芽苗；另一部分保存或继续扩繁，称之为母瓶；将接种后的分化培养基培养15~30天；培养条件为温度控制在19~20℃，光照强度为1500lux~2000lux，光照时间为5~6h；

继代增殖培养基的配制以7L为基数：

（1）称取白糖15g~20g、琼脂25g~40g，将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；

（2）配制母液：取大量元素70ml~190ml，微量元素10ml~29ml，铁盐10ml~20ml，有机成分10ml~20ml，NAA10ml~20ml，氯化钙10ml~25ml，肌醇10ml~20ml，生长素10ml~20ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（1）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的继代增殖培养基的pH值在4.0~7.0，母液中大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁，微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸，铁盐为硫酸亚铁，有机成分包括烟酸、VB6、VB1，生长素为6B-A；

分化培养基的配制以20L为基数：

（1）称取白糖400g~500g、琼脂70g~150g，将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入30升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；

（2）配制母液：取大量元素450ml~700ml，微量元素70ml~80ml，铁盐40ml~70ml，有机成分40ml~70ml，氯化钙70ml~120ml，肌醇15ml~60ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（1）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述生根培养基的pH值在3.0~5.0，母液中大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁，微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸，铁盐为硫酸亚铁，有机成分包括烟酸、VB6、VB1；

D、生根诱导：将步骤C得到的芽苗接种到生根培养基上，反复接种8~10次，待60~80天后植株高于瓶口且壮硕时进行炼苗；

生根培养基的配制以25L为基数：

（1）称取白糖700g~1400g、琼脂100g~200g，将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；

（2）配制母液：取大量元素650ml~900ml，微量元素90ml~180ml，铁盐60ml~90ml，有机成分60ml~90ml，NAA 45ml~90ml，氯化钙90ml~190ml，肌醇40ml~80ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（1）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述生根培养基的pH值在4.0~7.0，母液中大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁，微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸，铁盐为硫酸亚铁，有机成分包括烟酸、VB6、VB1；

所述的步骤B、C、D均在超净工作台上进行；

E、炼苗移栽：将步骤D得到的生根苗在室外进行炼苗8~18天，待苗适应外部环境，再将苗移栽到疏松透气的基质中，控制空气温度18~20度，相对湿度60%~70%，土壤湿度在20%~40%，遮荫，遮光率为72~78%，苗移栽前用多菌灵浸泡根部，并用50%甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒叶片，进行病虫害防治；当组培苗完全成活且植株的块茎达到1~1.5cm植株高度达到10~15cm，有分叉后的新芽破土而出，即可移向大田用于生产。